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文檔簡介
1、目的:探討基質細胞衍生因子-1(SDF-1)受體-CXCR4基因轉染豬骨髓間充質干細胞(MSCs)提高細胞體外遷移能力的可行性。
方法:(1)按照Nancer方法培養(yǎng)MSCs,轉染帶熒光的CXCR4基因,流式細胞儀檢測轉染前與轉染后MSCs的細胞周期。(2)用5-氮胞苷(5=aza)誘導轉染CXCR4基因的MSCs,并行結蛋白(desmin)、肌球蛋白重鏈(MHC)、心肌特異性肌鈣蛋白Ⅰ免疫細胞化學鑒定。對照組為未轉染CX
2、CR4基因的MSCs。(3)通過Transwell趨化實驗來檢測經過CXCR4轉染后的MSCs向SDF-1趨化能力的變化。
結果:(1)體外培養(yǎng)的原代MSCs10-14天達到融合,CXCR4基因轉染后的MSCs能成功表達CXCR4,轉染前后細胞周期無明顯改變。(2)與對照組相同,實驗組經5-aza刺激后,部分MSCs成梭形,結蛋白、肌球蛋白重鏈、心肌特異性肌鈣蛋白Ⅰ免疫細胞化學染色均為陽性。(3)Transwell趨化實驗
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