豬去卵丘卵母細(xì)胞體外發(fā)育能力的研究.pdf

1、本研究以豬卵巢為實(shí)驗(yàn)材料，對(duì)豬去卵丘卵母細(xì)胞的體外成熟和進(jìn)一步的胚胎發(fā)育能力進(jìn)行了研究，旨在為卵母細(xì)胞發(fā)育機(jī)理的研究提供有效手段，同時(shí)為拯救瀕危動(dòng)物提供借鑒。通過在成熟液中加入表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、不同濃度的V<,c>(0μM、50μM、100μM、250μM、500μM、750μM)和V<,E>(0μM、10μM、20μM、50μM、100μM、250μM)，及不同的共培養(yǎng)方法(單層顆粒細(xì)胞共培養(yǎng)(CCscoculture組)、顆粒

2、細(xì)胞復(fù)合體共培養(yǎng)(OOXcoculture組)和卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體共培養(yǎng)(COCscoculture組))，研究其對(duì)豬裸卵體外成熟和孤雌激活后胚胎發(fā)育的影響；另外還研究了卵母細(xì)胞的不同培養(yǎng)方式(DOs單獨(dú)培養(yǎng)(DOs組)、DOs與COCs共培養(yǎng)(coculturedDOs組)、COCs與DOs共培養(yǎng)(coculturedCOCs組)和COCs單獨(dú)培養(yǎng)(CEOs組))對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟和孤雌激活后胚胎發(fā)育的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，1ng/ml的E

3、GF、不同濃度的V<,c>和V<,E>的加人不能提高裸卵的體外成熟率和囊胚率；不同的共培養(yǎng)方法均不能提高裸卵的體外成熟率，但與對(duì)照組相比，CCscoculture組能顯著提高共培養(yǎng)裸卵的囊胚率(19.5％VS 3.57％，P<0.05)，OOXcoculture組(45％ VS 3.57％，P<0.01)和COCscoculture組(38.73％VS 3.57％，P<0.01)極顯著提高裸卵的囊胚率；對(duì)于不同培養(yǎng)方式下的卵母細(xì)胞發(fā)育情

4、況，DOs組(51.62％)和cocultureDOs組(41.81％)的成熟率顯著低于cocultureCEOs組(76.42％)和CEOs組(72.38％)的成熟率(P<0.05)，兩個(gè)DOs組之間成熟率差異不顯著(P>0.05)，兩個(gè)CEOs組之間成熟率差異也不顯著(P>0.05)，DOs組的囊胚率(3.57％)極顯著低于其他三組的囊胚率(43.33％，42.65％，45.5％)(P<0.01)，三組間囊胚率差異不顯著(P>0.0