金櫻子總黃酮對(duì)氧化損傷HUVEC保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：研究金櫻子總黃酮(Rosa laevigata Michx total flavonoids, RLMTF)對(duì)過氧化氫損傷人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vascular endothelial cells, HUVEC)的保護(hù)作用。
　　方法：
　　1.用不同濃度(200，400，600，800，1000μmol/L)的H2O2誘導(dǎo)HUVEC損傷構(gòu)建HUVEC氧化損傷模型，用倒置顯微鏡觀察HUVEC

2、的形態(tài)學(xué)變化，經(jīng)Hoechst33258染色后熒光顯微鏡下觀察各H2O2處理組細(xì)胞細(xì)胞核的形態(tài)學(xué)變化，采用MTT法測(cè)定各組細(xì)胞活力；
　　2.用鄰苯三酚自氧化法測(cè)定金櫻子總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用；采用水楊酸法測(cè)定金櫻子總黃酮對(duì)羥自由基的清除作用；
　　3.將細(xì)胞隨機(jī)分為六組：①正常組，② H2O2損傷組，③ Vc陽(yáng)性對(duì)照組，④0.12mg/mL金櫻子總黃酮保護(hù)組，⑤0.24mg/mL金櫻子總黃酮保護(hù)組，⑥0.48m

3、g/mL金櫻子總黃酮保護(hù)組，用試劑盒測(cè)定各組細(xì)胞培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶(SOD)，過氧化氫酶(CAT)，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力；采用Western-Blot法測(cè)定各組細(xì)胞凋亡抑制蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白Bax的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.與正常組細(xì)胞相比，600，800，1000μmol/L的H2O2處理組細(xì)胞活力顯著下降(P＜0.01)，而200μmol/L，400μmol/L H2O2處理組無顯著變

4、化；
　　2.在20-200μg范圍內(nèi)，隨著待測(cè)樣品的加入量增大，金櫻子總黃酮和Vc對(duì)羥自由基(·OH)的清除率逐漸增大，對(duì)超氧陰離子(O2-·)的清除率則是先增大后減少；蘆丁對(duì)·OH的清除率先增大后減小，而對(duì)O2-·的清除率逐漸減少；
　　3.①與H2O2損傷組比較，不同濃度金櫻子總黃酮處理組的細(xì)胞活力均顯著升高(P＜0.01)；②與H2O2損傷組比較，0.12mg/mL金櫻子總黃酮處理組細(xì)胞培養(yǎng)液中SOD活性無顯著升高，

5、0.12mg/mL，0.48mg/mL金櫻子總黃酮處理組細(xì)胞培養(yǎng)液中的SOD活性均顯著升高(P＜0.01)；不同濃度金櫻子總黃酮處理組細(xì)胞培養(yǎng)液中的CAT活性均顯著升高(P<0.05或 P<0.01)；不同濃度金櫻子總黃酮處理組細(xì)胞培養(yǎng)液中的GSH-Px活性均顯著升高(P<0.01)；③與H2O2損傷組比較，0.12mg/mL金櫻子總黃酮處理組Bcl-2蛋白表達(dá)無顯著升高，0.24mg/mL和0.48mg/mL金櫻子總黃酮處理組Bcl-