2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩86頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、新生兒窒息是圍產(chǎn)期醫(yī)學(xué)的重要課題。窒息產(chǎn)生的低氧血癥和酸中毒常導(dǎo)致多臟器損害,其中缺氧缺血性腦病(Hypoxic-IschemicBrainDamage,HIBD)是窒息后腦損傷死亡和傷殘的最常見原因。隨著新生兒重癥監(jiān)護的廣泛開展,窒息的搶救成功率在逐年提高,缺氧缺血性腦病患兒亦隨之相應(yīng)增加,25﹪的存活兒可呈現(xiàn)永久性腦損害如腦癱、癲癇、智力低下、學(xué)習(xí)困難及視聽障礙等臨床后遺癥。發(fā)展中國家HIBD發(fā)病率為3-12﹪,傷殘率及死亡率可高達

2、30﹪。據(jù)報道在孟加拉國死產(chǎn)胎兒中有15-20﹪是由HIBD所致;在我國則有7﹪-10﹪(140-200萬)的新生兒發(fā)病,其中約1/3的窒息兒死亡,30萬左右的窒息兒出現(xiàn)不同程度的殘疾。對此疾病目前臨床尚無統(tǒng)一、有力、完整的治療方案,特別是缺乏針對遠期有肯定療效的有效措施。 研究表明,針刺可改善各種原因所造成的認知障礙,包括老年性癡呆、血管性癡呆及糖尿病性癡呆等等。有報道稱,早期給予穴位注射可促進患兒智力發(fā)育,降低腦癱的發(fā)生。電

3、針圍產(chǎn)期缺血缺氧性腦損傷大鼠的“百會”穴,可通過影響海馬fos蛋白的表達,從而提高新生鼠遠期空間學(xué)習(xí)記憶能力。目前,以針刺為主的綜合療法是臨床治療小兒腦性疾病的最為常用的方法,但至今為止,所得結(jié)果多為臨床證據(jù),又總因選擇其病理過程的時期不同或病變已不可逆轉(zhuǎn),或功能不足代償?shù)?,使之存在療程長而療效不穩(wěn)定、相當(dāng)部分病例療效差等問題。本研究擬模擬圍產(chǎn)期窒息建立HIBD模型,并觀察早期針刺干預(yù)對其學(xué)習(xí)記憶能力的影響及其作用機制,著重研究針刺對海

4、馬突觸可塑性的影響、對海馬興奮性和抑制性神經(jīng)遞質(zhì)釋放的影響,以及對海馬興奮性和抑制性神經(jīng)細胞功能的影響及相互關(guān)系,為進一步研究其分子機制打下基礎(chǔ),為闡述針刺治療HIBD的機理提供新的科學(xué)資料,為推廣早期針刺改善新生兒學(xué)習(xí)記憶能力、提高針灸臨床療效提供實驗依據(jù)。 本實驗分為兩部分,首先模擬圍產(chǎn)期窒息建立HIBD模型,利用Morris水迷宮和海馬腦片長時程增強效應(yīng)(LTP)的記錄從整體和細胞水平來評價模型的學(xué)習(xí)記憶能力和針刺的治療作

5、用;隨后利用免疫組織化學(xué)方法觀察針刺對HIBD學(xué)習(xí)記憶障礙動物海馬Glu和GABA表達的影響,利用腦片膜片鉗全細胞記錄觀察HIBD是否導(dǎo)致海馬興奮性神經(jīng)元和抑制性神經(jīng)元的功能受損以及針刺是否可以對抗此效應(yīng),以探討HIBD學(xué)習(xí)記憶障礙的可能機理和針刺改善HIBD學(xué)習(xí)記憶障礙的可能機制。 1缺血缺氧對幼鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及針刺的治療作用1.1實驗方法1.1.1模擬圍產(chǎn)期窒息制備HIBD模型實驗用健康雌性Wistar大鼠,孕16天,

6、待其自然分娩,使用乳鼠102只。隨機分為正常對照組(Con),缺血缺氧組(HIBD),缺血缺氧+針刺組(HIBD+ACU)即針刺治療組,為避免系統(tǒng)誤差,每窩乳鼠三組均有入選。 在室溫22℃左右條件下,將出生后1小時左右的乳鼠放入50ml廣口瓶中,用橡皮塞塞緊,保持1小時。模型制作完畢后,仍將乳鼠放回母鼠所在籠中,與其它乳鼠共同喂養(yǎng)。 1.1.2針刺治療時間和選穴出生后第8天開始針刺治療。根據(jù)臨床文獻報道選臨床常用的穴位。

7、選穴原則從調(diào)督脈入手,因督脈為陽脈之海,總督一身之陽。刺激督脈,可振奮一身之陽,促進生長發(fā)育;督脈絡(luò)腎入腦,刺督脈可補髓益腦,改善智力。選取督脈的“百會”、“大椎”。手針治療,留針20min,1次/天,共治療10次,觀察針刺的治療作用。其余組別動物除不進行針刺處理外,其余處理均同針刺組。 1.1.3Morris水迷宮測試動物學(xué)習(xí)記憶能力出生后30天進行行為學(xué)測定。整個實驗過程分為隱藏平臺獲得實驗和空間搜索實驗兩部分。 隱

8、藏平臺獲得實驗:用于測量動物在水迷宮中的學(xué)習(xí)和記憶能力。實驗前動物自由游泳2min。正式實驗每天訓(xùn)練4次,每次180s,隨機從東、西、南、北四個入水點選擇一個,將動物面向池壁放入水中,記錄動物尋找并爬上平臺所需時間即逃避潛伏期(escapelatency)。實驗歷時7天。計算每天各組動物4次逃避潛伏期的平均值。 空間搜索實驗:用于測量動物對平臺空間位置準(zhǔn)確記憶,即記憶保持能力。第8天撤除平臺,任選一個入水點將動物放入水中,動物在

9、水中游泳180s。測量180s內(nèi):(1)動物在目標(biāo)象限(原平臺所在象限)(targetquadrant)和其他各象限的游泳時間;(2)動物在目標(biāo)象限和其他各象限游泳路徑的長短。 實驗數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示,組間差異采用ANOVA進行統(tǒng)計學(xué)分析。1.1.4蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色方法 行為學(xué)實驗結(jié)束后,對海馬進行HE染色觀察其CA1區(qū)細胞分布情況。采用腹腔注射1﹪戊巴比

10、妥鈉(40mg/Kg)麻醉后,常規(guī)心臟灌流固定,取腦,4℃冰箱過夜至組織塊沉底。對端腦做額狀面冰凍切片,片厚30μm。染色結(jié)果:細胞核藍染至深藍色,細胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維及嗜酸性顆粒呈粉紅色或淺紅色,兩色對比鮮明。普通光學(xué)顯微鏡下觀察各組動物海馬CA1區(qū)的細胞分布情況。 1.1.5海馬腦片長時程增強效應(yīng)(LTP)的誘發(fā)和記錄行為學(xué)實驗結(jié)束后,將幼鼠直接斷頭取腦,振動切片機將組織冠狀面切片,片厚450μm,然后將腦片移入含有飽和

11、混合氣(95﹪O2+CO2﹪)的人工腦脊液(ACSF),分離海馬,孵育一小時后,移入浴槽進行記錄。將刺激電極置于由CA3發(fā)出的Schaffer側(cè)枝路徑上,由電刺激器產(chǎn)生單刺激。記錄電極置于CA1錐體細胞層,深度50-100μm,誘發(fā)電位經(jīng)微電極放大器和前置放大后顯示在示波器上,經(jīng)Axon數(shù)據(jù)采集卡,將信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號,由Axoscope8.0軟件記錄。 在記錄誘發(fā)群峰電位的基礎(chǔ)上,先觀察10-15min的單刺激誘發(fā)反應(yīng),待記錄

12、穩(wěn)定后,用高頻串刺激(100串100Hz的強直刺激)誘發(fā)LTP。記錄海馬腦片高頻刺激后1h內(nèi)LTP的變化。計算其斜率變化和波幅變化。 對每組動物海馬受到高頻刺激后60min的不同時間點LTP變化(與刺激前比較)的斜率和波幅的百分比進行比較,采用one-wayANOVA進行統(tǒng)計學(xué)分析。 1.2結(jié)果1.2.1模型觀察缺氧10min新生鼠煩躁不安;缺氧15~20min所有大鼠出現(xiàn)紫紺,呼吸加深加快:20~30min新生鼠躁動劇

13、烈,拼命直立,將頭部伸向瓶口處,出現(xiàn)喘呼吸;35~60min乳鼠活動明顯減少,很少變換姿勢,紫紺更加明顯,呈黑紫色。出生時各組動物體重?zé)o明顯差異(P>0.05)。一個月后,動物的體重均有所增加,但HIBD組幼鼠的體重增長明顯落后于正常對照組(P<0.01)。 1.2.2Morris水迷宮學(xué)習(xí)記憶能力測試結(jié)果Morris水迷宮實驗檢測大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。隱藏平臺獲得實驗進行7天,各組動物的逃避潛伏期均隨游泳次數(shù)增多而減小,波形呈

14、鋸齒狀,說明動物對前次的學(xué)習(xí)有遺忘。HIBD幼鼠的平均潛伏期明顯高于正常對照組(P<0.05),針刺后有明顯好轉(zhuǎn)。 第8天撤掉目標(biāo)象限的臺子,進行空間搜索實驗,計算大鼠在目標(biāo)象限停留時間百分比和所游距離的百分比,用來檢測記憶保持能力。結(jié)果顯示正常和針刺兩組幼鼠的運動軌跡主要集中在原平臺附近,而HIBD幼鼠則多沿池壁游泳,運動軌跡雜亂無章。HIBD組動物在目標(biāo)象限停留的時間百分比最短(29.44±4.05﹪),游泳的距離百分比也最

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論