雌激素對卒中后抑郁大鼠神經(jīng)再生的作用.pdf

1、目的:
　　在卒中后抑郁(Post-stroke depression，PSD)實驗大鼠模型的基礎(chǔ)上，探討雌激素對PSD實驗大鼠模型行為學的劑量相關(guān)性;觀察雌激素對卒中后抑郁大鼠模型側(cè)腦室室下區(qū)(Subventricularzone，SVZ)神經(jīng)元再生的作用及探討劑量的相關(guān)性。
　　方法:
　　選取60只Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠，預(yù)飼養(yǎng)2周，進行雙側(cè)卵巢摘除術(shù)(Ovariectomy surgery

2、，OVX)。1周后線栓法制作短暫性大腦中動脈栓塞模型（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）。孤養(yǎng)，給予不可預(yù)見的慢性溫和刺激(Chronic unpredictable mild stress，CUMS)14天，大腦中動脈栓塞術(shù)前及不可預(yù)見慢性溫和刺激后通過曠場實驗及糖水偏好實驗觀察造模大鼠行為學改變，評估PSD造模是否成功。將大鼠隨機分組:對照組（OVX組）和PSD模型組(PSD組)。對照組常規(guī)

3、飼養(yǎng);PSD組再依據(jù)雌激素干預(yù)劑量分為5亞組:雌激素0μg組（0μg組）、雌激素1μ組（1μg組）、雌激素10μg組（10μg組）、雌激素25μg組（25μg組）、雌激素100μg組（100μg組）。PSD造模后，大鼠皮下注射0.1mL（含0、1、10、25、100μg）β-雌二醇的大豆油，每日1次。雌激素干預(yù)2周后給予行為學測試（曠場實驗、糖水偏好實驗和強迫游泳實驗），觀察（0、1、10、25、100μg）雌激素對卒中后抑郁大鼠模型抑

4、郁樣行為的影響。處死大鼠前2h，腹腔注射5-溴-2'-脫氧尿苷(5-Bromo-2'-deoxyuridine，BrdU，50 mg·kg-1)。應(yīng)用普通及熒光免疫組織化學方法探討側(cè)腦室(SVZ)神經(jīng)元再生的劑量相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1、行為學測定:
　　(1) PSD造模完成后，與對照組相比，PSD組曠場試驗水平運動(P＜0.05)及垂直運動(P＜0.05)活動減少;PSD組大鼠糖水攝入量降低，糖水偏好度差異顯著

5、(P＜0.01);慢性刺激后強迫游泳試驗中PSD組掙扎時間縮短(P＜0.01)。說明PSD造模成功。
　　(2)雌激素干預(yù)后行為學測定
　?、偬撬枚葘嶒?br>　　與雌激素0μg組比較，經(jīng)過雌激素干預(yù)2周后，1μg組糖水偏好度接近于0μg組水平(P＞0.05)。10μg和25μg雌激素干預(yù)后糖水攝入較0μg組增多，偏好度升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。100μg組大鼠糖水偏好度增加，但與0μg組比，無統(tǒng)計學意義(

6、P＞0.05)。
　?、跁鐖鰧嶒?br>　　水平運動評分:PSD大鼠藥物治療后，雌激素1μg組、10μg組、25μg組和100μg組水平活動評分比0μg組有上升，但1μg組無統(tǒng)計學差別(P＞0.05)。10μg組、25μg組100μg組水平活動評分明顯上升(P＜0.05)。
　　垂直運動評分:與0μg組相比較，10μg組和100μg組垂直活動評分增加(P＜0.05)，但1μg、25μg組增加無明顯差異(P＞0.05)。

7、>　　③強迫游泳實驗
　　掙扎時間:與0μg組比，雌激素1μg干預(yù)組掙扎時間無明顯變化。10μg組掙扎時間延長(P＜0.05)。25μg和100μg雌激素治療后，大鼠掙扎時間較0μg組無顯著差異（P＞0.05）。
　　2、血清雌激素水平測定
　　雌激素干預(yù)2周后，0μg組血清雌激素濃度為（164.7±17.94 pmol·L-1）與對照組無明顯區(qū)別;大鼠1μg組血清雌激素濃度為（239.7±14.79 pmol·L-1

8、）處于生理低劑量水平;10μg組濃度為（554.3±21.22 pmol·L-1）是雌激素生理劑量水平;25μg組血清雌激素濃度為（1269±49.50 pmol·L-1）處于生理高劑量水平;100μg組濃度為（3395±393.6 pmol·L-1）血清雌激素遠超生理劑量。
　　3、SVZ區(qū)神經(jīng)元再生
　　SVZ區(qū)BrdU標記后免疫組化結(jié)果顯示，與對照組比，小劑量雌激素（0μg或1μg）干預(yù)，BrdU陽性細胞數(shù)無顯著差別(

9、P＞0.05)。雌激素10μg組和25μg組細胞數(shù)目較雌激素0μg組增多明顯(P＜0.01，P＜0.05)。雌激素100μg組BrdU標記細胞數(shù)增多但較0μg組，無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　熒光免疫組化結(jié)果表明，SVZ區(qū)有BrdU及微管相關(guān)蛋白(Doublecortin，DCX)共表達的細胞。與0μg組相比，雌激素10μg組SVZ區(qū)BrdU及DCX共陽性細胞數(shù)明顯增多(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.在P