雌激素對(duì)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、目的:研究雌激素對(duì)胚胎神經(jīng)干細(xì)胞的分裂和分化的影響,了解雌激素對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞雌激素受體表達(dá)的調(diào)控作用,初步探討雌激素在神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中可能的作用機(jī)制.方法:取孕12-12.5天Wistar大鼠胚胎的大腦皮層細(xì)胞體外培養(yǎng),建立神經(jīng)干細(xì)胞模型,用終濃度10ng/ml 17 β-雌二醇改變培養(yǎng)環(huán)境,同時(shí)設(shè)立空白對(duì)照組,接種細(xì)胞后,隨機(jī)選取細(xì)胞,用BrdU標(biāo)記分裂、新生細(xì)胞,檢測(cè)神經(jīng)干細(xì)胞增殖能力的變化.在懸浮培養(yǎng)的條件下觀察17β-雌二醇對(duì)

2、神經(jīng)球形成和大小的影響,并觀察體外傳代后的神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)雌激素反應(yīng)情況,同時(shí)用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法檢測(cè)雌激素受體的表達(dá)水平.生物圖象處理系統(tǒng)(Nikon E800u,Spot2冷凍彩色數(shù)碼攝像系統(tǒng),MetaMorph)定量分析神經(jīng)干細(xì)胞分裂及雌激素受體的表達(dá)水平.結(jié)論:成功建立大鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型,觀察到在腦的性分化中起重要作用的17 β-雌二醇抑制神經(jīng)干細(xì)胞的分裂,誘導(dǎo)其形態(tài)上的分化.雌激素對(duì)體外傳代培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞分裂抑制的作用更