FK506殼聚糖緩釋膜對大鼠脊髓損傷后神經(jīng)再生作用的實驗研究.pdf

1、目的：觀察植入復(fù)合FK506殼聚糖緩釋膜對大鼠脊髓損傷后神經(jīng)再生及功能恢復(fù)的影響。 方法： 1．80只SD大鼠隨機分為四組，A組僅作T10椎板切除，其余三組用改良Allen's打擊法損傷脊髓。B組損傷后直接縫合切口，C組在脊髓表面放置殼聚糖膜，D組放置FK506殼聚糖緩釋膜。術(shù)后分1周，2周，3周，4周四個時間點進行觀察。 2．用CBS聯(lián)合評分方法，觀察動物后肢功能恢復(fù)情況。 3．取大鼠脊髓，用免疫熒光組

2、織化學(xué)法觀察損傷區(qū)及附近神經(jīng)細胞NF200蛋白以及星形膠質(zhì)細胞GFAP蛋白表達，用圖像分析系統(tǒng)計算各組陽性細胞灰度值。 4．取大鼠脊髓用RT-PCR方法，觀察各組動物脊髓GAP-43 mRNA表達情況，用圖像分析儀計算各樣品灰度值。 5．統(tǒng)計學(xué)處理：實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，使用SPSS16．0軟件包進行單因素分析，以P<0．01表示有統(tǒng)計意義。 結(jié)果： 1．B，C，D三組脊髓打擊傷后，運動功能逐漸恢復(fù)

3、，B，C兩組功能恢復(fù)情況基本一致。而從第二周開始，D組運動評分較B，C兩組明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0．01）。D組至第四周時評分達47．00±4．47 2．B，C，D三組SCI后NF200免疫熒光AU值減小，而行FK506緩釋膜處理的D組自第二周開始，AU值較B，C兩組明顯升高，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0．01）。從第四周的免疫熒光圖片可見，B，C兩組通過損傷區(qū)的軸突少且短，排列紊亂，染色淺。經(jīng)FK506緩釋膜處理的D組軸突排

4、列及再生情況均優(yōu)于B組和C組。與B，C組比較，各時間點內(nèi)，D組GFAP陽性細胞少，胞體較小，突起不明顯，損傷區(qū)周圍膠質(zhì)瘢痕形成較少。 3．術(shù)后觀察期內(nèi)A組GAP-43mRNA含量變化不明顯，維持低表達狀態(tài)。B，C，D三組GAP-43mRNA含量逐漸減少。且從術(shù)后一周開始，A組的GAP-43mRNA含量即較B組和C組顯著增加（P<0．01），且持續(xù)到術(shù)后4周。 結(jié)論： 1．殼聚糖復(fù)合FK506緩釋膜可促進大鼠脊髓挫