FK506對大鼠脊髓損傷后軸突導向因子slit-2mRNA和蛋白表達的影響.pdf

1、目的：觀察免疫抑制劑FK506對大鼠脊髓損傷后脊髓運動功能行為學的變化和病理改變，探討FK506對軸突導向因子slit-2表達的變化及意義，為臨床治療脊髓損傷提供實驗室依據。
　　 方法：選取健康成年SD大鼠150只，隨機平均分成三組：假手術組（n=30）、損傷組（n=60）和FK506治療組（n=60）。用Allen法建立大鼠T10脊髓損傷模型，各組動物分別于損傷后1、3、7、14和28 d 5個時相點采用BBB評分法進行脊髓

2、功能評分，后處死大鼠取損傷區(qū)脊髓組織觀察組織病理，用逆轉錄聚合酶鏈反應法（RT-PCR）和免疫組化法觀察軸突導向因子slit-2的變化及意義。
　　 結果：（1）BBB評分結果：假手術組脊髓神經功能正常，BBB評分達20分；損傷組和FK506治療組均有神經功能障礙表現(xiàn)，其中術后1、3 d評分均小于2分，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），術后7 d后治療組經FK506治療后神經功能較損傷組明顯改善，分值隨時間增加而變大，兩組間差異

3、有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。(2) HE染色結果：假手術組見脊髓灰白質界限清楚、神經元及髓鞘結構正常；而損傷組和治療組均有不同程度的變化，從局部片狀出血、周圍炎性細胞的浸潤、神經元胞體的萎縮、膠質細胞的反應性增生、白質呈網狀脫髓鞘及瘢痕形成，且治療組明顯輕于損傷組。（3）免疫組化法結果：slit-2在假手術組大鼠脊髓組織前角運動神經元中呈少量散在表達，損傷組和治療組灰質膠質細胞胞質和神經元胞質內可見明顯的slit-2的表達，且隨時間推

4、移而變化，術后3 d陽性細胞表達量開始增加，術后7 d達最高峰，之后呈下降趨勢，且治療組與損傷組各個時相點相比組間方差分析有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其中，術后3、7 d 2個時相點相比組間方差分析有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。（4）RT-PCR結果：假手術組slit-2 Mrna表達較低且穩(wěn)定，損傷組和治療組slit-2 Mrna的表達水平隨時間推移而變化，術后1d即可見slit-2 Mrna的表達，術后3d slit-2 Mrna

5、表達開始上調，于術后7 d達到峰值，之后slit-2 Mrna表達逐漸下降，各時相點組間方差分析有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其中，術后3、7 d 2個時相點相比組間方差分析有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　 結論:大鼠脊髓損傷后早期，應用低劑量FK506在一定程度上可促進運動功能的恢復及對軸突導向因子slit-2的表達具有明顯的促進作用，可能是通過FK506介導炎性細胞的遷移及分泌的因子對再生軸突的導向性的正確生長發(fā)揮重要的