乳腺癌中FHIT基因異常和肌上皮細(xì)胞免疫標(biāo)記物的研究.pdf

1、 目前常用的MEC標(biāo)記物主要有S-100、SMA(smoothmuscleactin，SMA)、calponin、SMMHC(smoothmusclemyosinheavychain，SMMHC)、CD10、p63等。目前的研究主要集中于上述一種標(biāo)記物在標(biāo)記MEC的敏感性和特異性上。對(duì)于各種標(biāo)記物敏感性和特異性的系統(tǒng)比較還未見(jiàn)報(bào)道。而且各種標(biāo)記物聯(lián)合應(yīng)用能否彌補(bǔ)各單一標(biāo)記物的缺陷，也未見(jiàn)報(bào)道。因此，系統(tǒng)比較上述各標(biāo)記物的敏感性和特

2、異性，以及篩選各標(biāo)記物的最佳聯(lián)合搭配，是本課題的另一重要內(nèi)容。研究結(jié)果如下： (1)乳腺癌組織中FHIT基因的LOH陽(yáng)性率在36例有信息個(gè)體中，至少有一個(gè)位點(diǎn)發(fā)生LOH的有12例，LOH的總陽(yáng)性率為33％(12/36)。FHIT在位點(diǎn)D3S1295、D3S1313和D3S4260的LOH陽(yáng)性率分別是23％、23％和17％。 (2)FHIT基因在乳腺癌中的異常甲基化38例乳腺癌標(biāo)本中，有16例(42％)發(fā)生了FHIT基因的

3、甲基化改變，48例正常對(duì)照組織中，5例(10％)出現(xiàn)了甲基化的擴(kuò)增。FHIT的異常甲基化和乳腺癌的組織學(xué)分級(jí)呈正相關(guān)(P＜0.05)。乳腺癌組織和周?chē)恼?duì)照組織中，都出現(xiàn)了非甲基化的擴(kuò)增(100％)。 (3)FHIT基因在乳腺癌中的表達(dá)38例腫瘤組織中，13例表達(dá)FHIT蛋白，陽(yáng)性率為34％(13/38)。FHIT蛋白的表達(dá)和乳腺癌的組織學(xué)分級(jí)相關(guān)，在Ⅲ級(jí)乳腺癌中的表達(dá)率顯著低于Ⅰ+Ⅱ級(jí)中的表達(dá)率(P＜0.05)。

4、(4)FHIT基因的等位性缺失、甲基化和蛋白表達(dá)的關(guān)聯(lián)性分析在發(fā)生LOH的12例乳腺癌中，有9例發(fā)生了異常甲基化(9/12)；在發(fā)生ROH的26例乳腺癌中，有7例發(fā)生了異常甲基化(7/26)，異常甲基化在LOH的病例中的發(fā)生率顯著高于在雜合性保留(retentionofheterozygosity，ROH)的病例中的發(fā)生率(P＜0.01)。因此可以得出，在乳腺癌中，F(xiàn)HIT基因的等位性缺失和異常甲基化呈正相關(guān)。 12例發(fā)生FHI

5、T基因等位性缺失的病例中，只有2例表達(dá)FHIT蛋白；而未發(fā)生等位性缺失的26例乳腺癌中，有11例表達(dá)FHIT蛋白。FHIT基因的等位性缺失和蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。 (5)cyclinD1在乳腺病變中的表達(dá)8例不伴有異型增生的乳腺良性病變均不表達(dá)cyclinD1，陽(yáng)性率為0％(0/8)；2例導(dǎo)管上皮異型增生的病例有1例表達(dá)cyclinD1，陽(yáng)性率為50％(1/2)；6例導(dǎo)管原位癌中，1例表達(dá)cyclinD1，陽(yáng)性率為1

6、7％(1/6)。34例浸潤(rùn)性癌中，14例表達(dá)cyclinD1，陽(yáng)性率為41％(14/34)。cyclinD1在乳腺良性病變中的表達(dá)(10％)低于惡性病變中的表達(dá)(38％)，但二者相比沒(méi)有顯著性差異(x2=3.529，p＞0.05)。但乳腺異型增生病例中的陽(yáng)性表達(dá)率(38％，16/42)顯著高于正常型增生及無(wú)增生的病例(0％，0/8)(x2=4.482，P＜0.05)。在和乳腺癌的臨床病理學(xué)參數(shù)間的相關(guān)性分析中，cyclinD1的表達(dá)和乳

7、腺癌的臨床病理學(xué)參數(shù)間沒(méi)有相關(guān)性。 (6)Ki-67在乳腺良、惡性病變中的表達(dá)10例乳腺良性病變中(8例不伴有導(dǎo)管上皮異型增生和2例伴有導(dǎo)管上皮異型增生)，都有極少數(shù)的Ki-67陽(yáng)性細(xì)胞，這些陽(yáng)性細(xì)胞主要是肌上皮細(xì)胞，少部分為乳腺上皮細(xì)胞。由于Ki-67陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)不到乳腺實(shí)質(zhì)細(xì)胞總數(shù)的10％，因此10例乳腺良性病變都是Ki-67陰性，陽(yáng)性率為0％(0/10)。6例導(dǎo)管原位癌中，3例表達(dá)Ki-67，陽(yáng)性率為50％(3/6)，34例

8、浸潤(rùn)性癌中，有22例表達(dá)Ki-67，陽(yáng)性率為65％(22/34)。Ki-67在乳腺癌中的表達(dá)(25/40)顯著高于在良性病變中的表達(dá)(0/10)，(P＜0.01)。Ki-67在乳腺浸潤(rùn)性癌的表達(dá)率(65％)高于原位癌中的表達(dá)率(50％)，但二者相比差異不顯著(P＞0.05)。Ki-67表達(dá)和乳腺癌的組織學(xué)分級(jí)相關(guān)，Ki-67在組織學(xué)級(jí)別高的乳腺癌中表達(dá)率高。 (7)Bax在乳腺良、惡性病變中的表達(dá)Bax在乳腺良性病變中的陽(yáng)性表達(dá)

9、率是30％(3/10)，在乳腺癌中的陽(yáng)性率是67.5％(27/40)，Bax在乳腺癌中的陽(yáng)性率顯著高于良性病變中的陽(yáng)性(P＜0.05)。Bax的表達(dá)和乳腺癌的組織學(xué)級(jí)別正相關(guān)，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性病例中的表達(dá)顯著高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性病例中的表達(dá)。Bax表達(dá)和乳腺癌的其他臨床病理參數(shù)沒(méi)有相關(guān)性。 (8)FHIT，Ki-67，cyclinD1和Bax表達(dá)的關(guān)聯(lián)性分析通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，F(xiàn)HIT在乳腺癌中的表達(dá)和Ki-67、cyclinD1的表

10、達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)(P＜0.05)。FHIT和Bax的表達(dá)沒(méi)有相關(guān)性(P＞0.05)。Ki-67的表達(dá)和cyclinD1、Bax呈正相關(guān)(P＜0.05)(P＜0.05)。 (9)S-100在乳腺良、惡性病變中的表達(dá)在乳腺增生病、纖維腺瘤、導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤和良性葉狀腫瘤等良性病變中，均可見(jiàn)S-100陽(yáng)性的MEC環(huán)繞EC。但MEC的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)多少不等，在30例良性病變中，MEC陽(yáng)性率在30％～80％，主要在50％左右。而且乳腺

11、EC也表達(dá)S-100，EC陽(yáng)性率小于MEC陽(yáng)性率，一般在20％～50％。 (10)SMA和calponin在乳腺良、惡性病變中的表達(dá)在乳腺良性病變中，均可見(jiàn)SMA陽(yáng)性的MEC呈花環(huán)狀完整地圍繞增生的小導(dǎo)管外周，所有的EC都是SMA陰性。在某些病例中，隨著導(dǎo)管上皮的增生，導(dǎo)管上皮巢不斷增大，上皮巢外周的陽(yáng)性細(xì)胞變的更為扁平，由原來(lái)的花環(huán)狀環(huán)繞變?yōu)槌始?xì)線裝環(huán)繞于增生的上皮細(xì)胞巢的外周。乳腺增生病中可見(jiàn)一些囊性擴(kuò)張的腺體，隨著腺腔的擴(kuò)

12、大，腺腔周?chē)年?yáng)性細(xì)胞也呈細(xì)線狀環(huán)繞。伴大汗腺化生的腺體外周可見(jiàn)SMA陽(yáng)性細(xì)胞環(huán)繞，大汗腺化生的腺上皮細(xì)胞不表達(dá)SMA。導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤中，呈乳頭狀增生的腺上皮不表達(dá)SMA，在腺上皮和纖維脈管束之間可見(jiàn)一層連續(xù)的SMA陽(yáng)性細(xì)胞。 導(dǎo)管內(nèi)癌中，有一例是囊內(nèi)高分化乳頭狀癌，在纖維脈管束構(gòu)成的軸心內(nèi)可見(jiàn)大量的SMA陽(yáng)性細(xì)胞。陽(yáng)性細(xì)胞不是MEC，而是平滑肌細(xì)胞。其它導(dǎo)管內(nèi)癌的病例中，癌細(xì)胞巢周?chē)梢?jiàn)大量陽(yáng)性細(xì)胞環(huán)繞，陽(yáng)性細(xì)胞不僅有MEC，

13、還有肌纖維母細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞。環(huán)繞癌細(xì)胞巢的MEC由連續(xù)到不連續(xù)，甚至完全缺失。 (11)CD10在乳腺良、惡性病變中的表達(dá)良性病變中，幾乎所有的MEC都表達(dá)CD10，EC不表達(dá)CD10。有3例良性病變中可見(jiàn)少許EC表達(dá)CD10。伴大汗腺化生的腺體周?chē)梢?jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞環(huán)繞，化生的細(xì)胞表達(dá)CD10。 在導(dǎo)管原位癌中，癌細(xì)胞巢周?chē)梢?jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞環(huán)繞，陽(yáng)性細(xì)胞由于受擠壓呈細(xì)線狀環(huán)繞。在浸潤(rùn)性癌中，有3例癌細(xì)胞表達(dá)CD10。其他病

14、例中的癌細(xì)胞都不表達(dá)CD10。 在乳腺良性病變中，肌纖維母細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞都不表達(dá)CD10。在30例乳腺癌的病例中，血管平滑肌細(xì)胞都不表達(dá)CD10，有5例發(fā)現(xiàn)有肌纖維母細(xì)胞表達(dá)CD10。 (12)p63在乳腺良、惡性病變中的表達(dá)在30例良性病例中，幾乎所有的MEC都表達(dá)p63。P63在導(dǎo)管內(nèi)癌中的表達(dá)和CD10的表達(dá)基本一致，在2例中可見(jiàn)少許癌細(xì)胞表達(dá)p63。在浸潤(rùn)性癌中，癌細(xì)胞都不表達(dá)p63，癌細(xì)胞巢周?chē)膊灰?jiàn)p6