爵床化學(xué)成分及其生物活性研究.pdf

1、爵床是爵床科（Acanthaceae）植物爵床Justicia procumbensL.的干燥全草，有清熱解毒，利尿消腫之功效，臨床用于治療咳嗽喉痛、感冒發(fā)熱等癥，主要分布于我國西南、南部各省區(qū)及臺灣地區(qū)，資源較為豐富。爵床全草中含有豐富的木脂素及其苷類化合物，現(xiàn)代藥理研究證明其具有明顯的抗腫瘤、抗病毒等作用。
　　通過實驗室前期對66種清熱解毒類中草藥體外抗H5N1病毒活性篩選實驗發(fā)現(xiàn)，爵床總提物、三氯甲烷部位和正丁醇部位均具有

2、顯著的抗病毒活性。本文在綜述了爵床屬Justicia植物化學(xué)成分和生物活性研究的基礎(chǔ)上，對爵床的化學(xué)成分進(jìn)行了較為系統(tǒng)深入的研究，并對所得部分化合物進(jìn)行了抗H5N1病毒和抗腫瘤活性研究，以期能得到具有較好生物活性或結(jié)構(gòu)新穎的化合物，為進(jìn)一步探索爵床活性成分，闡明其生物活性物質(zhì)基礎(chǔ)提供科學(xué)依據(jù)。
　　在采用了正相硅膠柱色譜、AB-8大孔樹脂柱色譜、反相C18柱色譜、中壓制備柱色譜、Sphadex LH-20凝膠柱色譜以及PHPLC等

3、多種色譜分離方法后，通過理化性質(zhì)和MS、IR、NMR(1H、13C、1H-1H COSY、HMQC、HMBC、NOESY)等現(xiàn)代波譜學(xué)技術(shù)，從爵床中共鑒定了58個化合物的結(jié)構(gòu)，其中新化合物13個，鑒定的58個化合物分別為:PronaphthalideA(1)，爵床苷J(rèn)(2)，Procumbiene(3)，Juspurpudin(4)，爵床苷H(5)，爵床苷I(6)，爵床苷K(7)，爵床苷L(8)，爵床苷M(9),Justicianene

4、A(10),Justicianene B(11),Justicianene C(12)，Justicianene D(13)，爵床脂素C(14)，爵床脂素D(15)，爵床脂素E(16),5'-methoxy retrochinensin(17),Detetrahydroconidendrin(18),JusticidinosideA(19)，爵床脂素A(20)，爵床脂素B(21)，6'-羥基爵床脂素A(22)，6'-羥基爵床脂素B(23

5、)，山荷葉素(24)，臺灣脂素C(25)，Tuberculatin(26)，Cleistanthin B(27),Justicidinoside B(28),Justicidinoside C(29)，爵床苷A(30)，爵床苷B(31)，RostellulinA(32)，(+)-松脂醇(33)，(-)-丁香樹脂酚(34)，(-)-杜仲樹脂酚(35)，表松脂醇(36)，異東莨菪素(37)，4，4'-二羥基-3，3'-二甲氧基苯甲酮(38)

6、，4，4'二羥基-3，3'，5'-三甲氧基苯甲酮(39)，大黃酚(40)，1，7-二羥基-3，8-二甲氧基呫噸酮(41)，熊果酸(42)，β-谷甾醇(43)，豆甾醇(44)，β-胡蘿卜苷(45)，對羥基苯甲酸(46)，香草酸(47)，9，16-二羰基-10(E)，12(Z)，14(E)-三烯-十八碳酸(48)，Pinellic acid(49)，槲皮素(50)，芹菜素-7-O-β-D-(6"-p-香豆酰基)-葡萄糖苷(51)，洋芹素-7

7、-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(52)，金合歡素-7-O-β-D-蘆丁糖苷(53)，Lumichrome(54)，3-吲哚酸(55)，5-Hydroxypyrrolidine-2-one(56)，腺苷(57)，尿素(58)。其中化合物1-13為新化合物，分別為9個木脂素類，4個環(huán)肽生物堿類，另外化合物17、18、27、34、36、38-41、46、48-49、51、53-58為首次從爵床屬中分離到的19個化合物，化合物33、35為首次從該植

8、物中分離得到。
　　從爵床中分離到的這些化合物類型包括32個木脂素及其苷類，4個環(huán)肽生物堿，4個黃酮類化合物，5個含氮化合物以及13個其他類型化合物。其中從爵床60％乙醇提取物的正丁醇部位50％乙醇洗脫物中分離到4個新的環(huán)肽生物堿，這是從爵床屬中首次發(fā)現(xiàn)環(huán)肽生物堿的存在，以往國內(nèi)外對爵床化學(xué)成分的研究多集中在其高濃度甲醇或乙醇提取物的主要成分木脂素及其苷上，只在爵床屬其他種中發(fā)現(xiàn)少數(shù)生物堿，本文從爵床60％乙醇提取物正丁醇部位得到

9、的環(huán)肽生物堿類化合物及其他含氮化合物為本屬植物化學(xué)成分研究開辟了另一途徑。
　　本論文采用CPE法，對從爵床三氯甲烷活性部位中得到的部分化合物的體外抗H5N1病毒活性進(jìn)行了初步篩選和評價，主要包括15個木脂素類化合物。結(jié)果顯示，化合物26和化合物33具有一定程度的抗H5N1病毒活性，其中化合物33在濃度為37.5μg/mL時，CPE結(jié)果為“++”，呈現(xiàn)一定的劑量依賴關(guān)系，化合物26在濃度為150μg/mL時，CPE結(jié)果為“++”，

10、它們在爵床中含量豐富，可以進(jìn)一步通過血凝實驗及深入的體內(nèi)動物實驗研究確證其抗病毒的效果和機(jī)制。
　　現(xiàn)代藥理研究表明爵床中的主要化學(xué)成分木脂素具有明顯的抗腫瘤活性，在此基礎(chǔ)上，采用MTT法，選用人結(jié)腸癌細(xì)胞株LoVo和人胃癌細(xì)胞株BGC-823，對爵床中的部分木脂素的體外抗腫瘤活性進(jìn)行了初步篩選和評價。結(jié)果顯示，化合物1、2、20、21、22、23、24、26均顯示強的細(xì)胞毒活性，其中新化合物1在LoVo和BGC-823細(xì)胞上的I

11、C50值分別為0.13和0.11μM，新化合物2的IC50值分別為0.53和0.20μM，化合物20在兩種細(xì)胞株上的IC50值均為0.04μM，化合物21的IC50值分別為6.08和0.18μM，化合物22的IC50值分別為0.15和0.42μM，化合物23的IC50值分別為2.36和4.68μM，化合物24的IC50值分別為8.12和8.08μM，化合物26在BGC-823細(xì)胞上的IC50值為1.63μM。化合物5和27對LoVo細(xì)胞

12、選擇性顯示中等強度抑制活性，IC50值分別為17.91和21.48μM，對BGC-823細(xì)胞沒有明顯活性，其他化合物均無活性或活性很弱。將上述強細(xì)胞毒活性化合物分別與兩種細(xì)胞株的陽性對照藥進(jìn)行組間統(tǒng)計學(xué)差異分析，發(fā)現(xiàn)化合物1、2、20、22、23對LoVo細(xì)胞的細(xì)胞毒活性顯著高于陽性對照藥Diphyllin(24)，化合物1和20對BGC-823細(xì)胞的細(xì)胞毒活性顯著高于陽性對照藥JR6(22)，并且化合物20的細(xì)胞毒活性顯著高于所有活性