孕期低劑量酒精暴露對(duì)乳腺干-祖細(xì)胞的影響.pdf

1、乳腺癌是當(dāng)今世界女性最多發(fā)的惡性腫瘤。乳腺癌的發(fā)病原因至今仍不是很清楚，目前認(rèn)為乳腺癌的發(fā)生發(fā)展與內(nèi)分泌、遺傳、環(huán)境等因素及不良的生活的方式有關(guān)。其中，吸煙和飲酒是威脅人類(lèi)健康的兩大因素。已有報(bào)道稱(chēng)飲酒會(huì)增加女性患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)。有研究表明，在子宮內(nèi)酒精暴露還會(huì)增加嚙齒動(dòng)物后代對(duì)致癌物質(zhì)引起的乳腺腫瘤的易感性。
　　目的：
　　研究孕期低劑量酒精暴露對(duì)乳腺干/祖細(xì)胞的影響。
　　方法:
　　本研究模擬孕婦在懷孕期間

2、低劑量的飲酒，給C57BL/6-GFP和C57BL/6兩個(gè)品系的孕鼠在其懷孕11天時(shí)連續(xù)6天灌胃0.5 g/kg/d的酒精。采集血清、乳腺和子宮等組織進(jìn)行研究。
　　本實(shí)驗(yàn)研究?jī)?nèi)容分為兩部分:
　　第一部分是研究孕期低劑量酒精暴露對(duì)子代雌鼠雌二醇、胰島素樣生長(zhǎng)因子、乳腺整體形態(tài)和導(dǎo)管形態(tài)，及其上的雌二醇受體和胰島素樣生長(zhǎng)因子受體的影響。
　　第二部分是對(duì)乳腺干細(xì)胞進(jìn)行體外定性和定量分析，以查看孕期低劑量酒精暴露對(duì)子代小

3、鼠乳腺干細(xì)胞數(shù)量和比例的影響。同時(shí)，利用干細(xì)胞體內(nèi)移植再生實(shí)驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)孕期低劑量酒精暴露對(duì)子代小鼠乳腺干細(xì)胞功能的影響。
　　結(jié)果:
　　本研究的第一部分結(jié)果顯示，孕期低劑量酒精暴露使母鼠體內(nèi)的胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF-1)水平顯著升高，其乳腺導(dǎo)管增生比例也顯著性增加。對(duì)其子代小鼠而言，當(dāng)子代小鼠3周齡時(shí)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，其乳腺導(dǎo)管距淋巴結(jié)的距離顯著性減少，即實(shí)驗(yàn)組小鼠的乳腺導(dǎo)管普遍離淋巴結(jié)較近。并且實(shí)驗(yàn)組小鼠體內(nèi)雌二醇(

4、E2)水平顯著性升高，而IGF-1水平則顯著性減少。當(dāng)子代小鼠6周齡大時(shí)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，乳腺導(dǎo)管占整個(gè)乳腺的比例、乳腺導(dǎo)管末段芽(TEB)的數(shù)量及體內(nèi)IGF-1的水平都有顯著性增加，而E2的水平則沒(méi)有顯著性變化。當(dāng)子代小鼠4月齡時(shí)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，體內(nèi)IGF-1的水平顯著性降低了。
　　第二部分研究結(jié)果顯示，小鼠乳腺經(jīng)流式細(xì)胞儀分選后，雖然實(shí)驗(yàn)組的基底細(xì)胞群和管腔細(xì)胞群的數(shù)目與對(duì)照組之間沒(méi)有顯著性差異，但是孕期低劑量酒精

5、暴露后使小鼠乳腺基底細(xì)胞在總的乳腺上皮細(xì)胞的比例有升高的趨勢(shì)，乳腺管腔細(xì)胞在總的乳腺上皮細(xì)胞的比例也有升高的趨勢(shì)，具體體現(xiàn)在管腔細(xì)胞中干細(xì)胞抗原-1(Sca1)陰性細(xì)胞數(shù)有升高的趨勢(shì)。而乳腺基底細(xì)胞的數(shù)量又有比管腔細(xì)胞數(shù)量多的趨勢(shì)。細(xì)胞群形成的乳腺微球種植在基底膜基質(zhì)中能夠進(jìn)一步分化形成特定的實(shí)體3D結(jié)構(gòu)。體內(nèi)移植再生實(shí)驗(yàn)證明這些實(shí)體3D結(jié)構(gòu)能夠生成新的再生乳腺。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組相比，移植基底細(xì)胞形成的實(shí)心3D結(jié)構(gòu)和管腔細(xì)胞

6、形成的空心3D結(jié)構(gòu)的乳腺再生率都有所降低，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組中乳腺干細(xì)胞的再生能力受到損害。
　　結(jié)論:
　　孕期低劑量酒精暴露導(dǎo)致子代小鼠青春期乳腺（6周齡）導(dǎo)管TEBs數(shù)和乳腺導(dǎo)管占整個(gè)乳腺的比例增加。使不同時(shí)期子代體內(nèi)激素水平紊亂。且孕期低劑量酒精暴露還導(dǎo)致子代乳腺干細(xì)胞和祖細(xì)胞比例有增加的趨勢(shì);進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，祖細(xì)胞比例的升高主要表現(xiàn)為Scal-祖細(xì)胞比例的升高。孕期低劑量酒精暴露還影響了子代乳腺干/祖細(xì)胞的再生功能。研究結(jié)