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文檔簡介
1、孕期酒精暴露(prenatal alcohol exposure,PAE)會導(dǎo)致胎兒流產(chǎn)、死產(chǎn)、胎兒顏面部畸形、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育畸形以及出生后認(rèn)知障礙等。本研究建立孕期酒精暴露(PAE)模型,研究孕期酒精暴露對小鼠視皮質(zhì)突觸數(shù)量的影響。利用免疫熒光染色技術(shù)標(biāo)記對照組與PAE模型組(低劑量和高劑量)子鼠出生后0、7、14、30天視皮質(zhì)突觸前體的synaptophysin熒光顆粒,觀察其數(shù)密度變化,并利用Westernblotting方法對各實
2、驗組子代小鼠視皮質(zhì)synaptophysin的表達(dá)量進(jìn)行半定量分析。
具體結(jié)果如下:
synaptophysin熒光顆粒代表的突觸數(shù)量隨子鼠孕期酒精暴露劑量升高而下降,同時隨子鼠年齡的增長而升高。橫向比較(劑量依賴性比較),自對照組、低劑量組、高劑量組突觸數(shù)密度呈下降趨勢;縱向比較(長時程效應(yīng)比較),隨年齡增加突觸數(shù)密度呈上升趨勢。對照組內(nèi)P0、P7、P14和P30間存在顯著差異P<0.05,但是在同一水平的
3、酒精處理組內(nèi)P0、P7、P14和P30的個別組無顯著性差異P>0.05。年齡與劑量兩個因素之間存在交互作用,而且劑量(MS=9.75,F(xiàn)=140.44,P<0.05)的影響比年齡(MS=6.55,F(xiàn)=94.26,P<0.05)的影響作用稍大。FishierLSD檢驗在有顯著差異的兩組之間進(jìn)行均數(shù)差值比較,發(fā)現(xiàn)年齡增高使對照組與酒精處理組的差異增大,并且對照組與高劑量組的差異大于對照組與低劑量組的差異。
利用Westernb
4、lotting對PAE模型組和對照組子鼠P30、P14、P0進(jìn)行synaptophysin半定量檢測,以陽性條帶與β-actin條帶光密度比值作為synaptophysin的相對表達(dá)值,結(jié)果顯示:(1)synaptophysin在膠片上顯示為分子量為38KD的活化片段;(2)synaptophysin蛋白表達(dá)量隨子鼠年齡增長而增高,各年齡組組間差異顯著(P<0.05);(3)酒精處理組低于對照組(P<0.05),高劑量組低于低劑量組(P
5、<0.05),即孕期酒精暴露使子鼠視皮質(zhì)synaptophysin蛋白表達(dá)量下降且具有劑量依賴性。
總之,孕期酒精暴露將造成子代突觸數(shù)量的丟失,并且其對子代神經(jīng)系統(tǒng)的影響具有劑量相關(guān)性及長時程放大效應(yīng)。一方面我們應(yīng)該充分認(rèn)識到孕期飲酒對胎兒發(fā)育及家庭社會帶來的不利影響,要求孕婦避免飲酒;另一方面我們也應(yīng)該看到孕期酒精暴露對子代神經(jīng)系統(tǒng)影響的機(jī)制、FAS的產(chǎn)前診斷、孕期酒精暴露出生后胎兒治療有關(guān)的藥物開發(fā)等諸多領(lǐng)域都大有可為
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