當歸多糖在合成當歸多糖鐵復合物前后的結(jié)構(gòu)比較.pdf

1、當歸多糖是中藥當歸發(fā)揮補血活血作用的活性成分。參照已上市的多糖鐵復合物力菲能，本實驗室以當歸多糖和三氯化鐵為原料成功合成了當歸多糖鐵復合物，經(jīng)藥理實驗證實當歸多糖鐵復合物確有顯著的補鐵作用，并能產(chǎn)生協(xié)同補血的作用。本論文首次報道了當歸多糖ASP1和ASP2的結(jié)構(gòu)，并首次考察了多糖鐵復合物中的多糖結(jié)構(gòu)，對合成當歸多糖鐵復合物前后的當歸多糖的結(jié)構(gòu)進行比較，為研究當歸多糖鐵復合物在分子水平上的作用機理提供理論依據(jù)。
　　 第一部分：當

2、歸多糖ASP1、ASP2的提取分離純化及其結(jié)構(gòu)鑒定
　　 由水提醇沉法得到的當歸粗多糖，經(jīng)由堿沉酸調(diào)除去蛋白質(zhì)后得到一定純度的當歸多糖，通過Sephadex G-50 葡聚糖凝膠柱洗脫，得到分子量不同的當歸多糖ASP1和ASP2。
　　 采用高效凝膠色譜測定ASP1的分子量，結(jié)果顯示ASP1 分子量單一，重均分子量約為7.8×104 Da；將ASP1 水解衍生化后進行氣相色譜分析，結(jié)果表明ASP1的單糖組成及比例為阿拉伯

3、糖：葡萄糖：半乳糖=1：5.68：3.91；由Smith降解反應(yīng)的結(jié)果推測,ASP1的連接方式有1→4 連接和1→6 連接;由甲基化反應(yīng)的結(jié)果可推測，ASP1的主鏈主要由1→4 連接的葡萄糖和1→6 連接的半乳糖組成，其摩爾比約為2：1；紅外光譜證實，ASP1 主要為含有α、β糖苷鍵的吡喃糖環(huán)結(jié)構(gòu),其中不含甘露糖；核磁共振譜結(jié)果表明ASP1中含有以下結(jié)構(gòu)：α-Ara-(1→4)-β-Gala-/-β-Gala-(1→4)-α-Glu-/

4、-α-Glu-(1→6)-β-Gala-采用葡聚糖凝膠柱法測定ASP2的分子量，結(jié)果顯示ASP2 分子量單一，重均分子量約為1620Da；將ASP2 水解衍生化后進行氣相色譜分析，結(jié)果表明ASP2的單糖組成為葡萄糖；由Smith降解反應(yīng)的結(jié)果推測,ASP2的連接方式有1→4 連接和1→6 連接;由甲基化反應(yīng)的結(jié)果可推測，ASP2 是以1→6 連接為主，有部分1→4 連接的直鏈葡聚糖；紅外光譜證實，ASP2 主要為含有α糖苷鍵的吡喃糖環(huán)結(jié)

5、構(gòu)，其中不含甘露糖；核磁共振譜結(jié)果表明 ASP2中含有以下結(jié)構(gòu)：-α-Glu-(1→6)-α-Glu-
　　 第二部分當歸多糖鐵復合物外層鞘狀多糖ASP3的分離純化及其結(jié)構(gòu)鑒定
　　 當歸多糖鐵復合物是以FeOOH 聚合鐵核為結(jié)構(gòu)中心，在聚合鐵核上穩(wěn)定螯合了一層多糖鏈形成鐵核分子，鐵核分子外部再包繞一層親水性的鞘狀多糖鏈。
　　 當歸多糖鐵復合物經(jīng)Sephadex G-50 葡聚糖凝膠柱洗脫，得鐵核和外層鞘狀多糖

6、ASP3。
　　 采用葡聚糖凝膠柱法測定ASP3的分子量，結(jié)果顯示ASP3 分子量單一，重均分子量約為1620Da；將ASP3 水解衍生化后進行氣相色譜分析，結(jié)果表明ASP3的單糖組成為葡萄糖；由Smith降解反應(yīng)的結(jié)果推測,ASP3的連接方式有1→4連接和1→6 連接;由甲基化反應(yīng)的結(jié)果可推測，ASP3 是以1→4 連接為主，有部分1→6 連接的直鏈葡聚糖；紅外光譜證實，ASP3 主要為含有α糖苷鍵的吡喃糖環(huán)結(jié)構(gòu)；核磁共振譜的

7、結(jié)果說明ASP3中至少有3種不同化學環(huán)境的糖殘基。
　　 第三部分當歸多糖ASP1、ASP2與當歸多糖鐵復合物外層鞘狀多糖ASP3的結(jié)構(gòu)比較
　　 ASP1的重均分子量約為7.8×104 Da；ASP2和ASP3的重均分子量為1620 Da。
　　 ASP1的單糖組成及比例為阿拉伯糖：葡萄糖：半乳糖=1：5.68：3.91；ASP2和ASP3的單糖組成均為葡萄糖。
　　 ASP1的主鏈主要由1→4 連接的

8、葡萄糖和1→6 連接的半乳糖組成，其摩爾比約為2：1；ASP2 由1→6 連接的葡萄糖和少量1→4 連接的葡萄糖組成；ASP3 由1→4 連接的葡萄糖和少量1→6 連接的葡萄糖組成。
　　 ASP1 主要為含有α、β糖苷鍵的吡喃糖環(huán)結(jié)構(gòu)；ASP2和ASP3 主要為含有α糖苷鍵的吡喃糖環(huán)結(jié)構(gòu)，三者均不含甘露糖。
　　 合成當歸多糖鐵復合物前，當歸多糖包含ASP1和ASP2 兩部分；合成當歸多糖鐵復合物后，經(jīng)葡聚糖凝膠柱洗脫