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1、目的:通過(guò)檢測(cè)LXA4干預(yù)肥胖大鼠前后T淋巴細(xì)胞免疫功能水平的變化,探討LXA4可能改善幼年肥胖大鼠免疫功能受損的作用,為兒童肥胖癥所引起疾病的防治提供新的思路。
方法:1復(fù)制模型及實(shí)驗(yàn)分組:選取3周齡斷乳期雌,康清潔級(jí)SD大鼠32只,體重75~80g,用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組(8只)、模型組(8只)、干預(yù)組(16只)。①模型組:通過(guò)高脂飼料喂養(yǎng)復(fù)制食源性單純幼年大鼠肥胖模型。②干預(yù)組:根據(jù)脂氧素A4的不同劑量分
2、為低劑量組(LXA4.1組)和高劑量組(LXA4.2組)兩個(gè)亞組,每組8只大鼠,食源性單純大鼠肥胖模型復(fù)制成功后,經(jīng)尾靜脈緩慢靜推不同濃度的脂氧素A4(LXA40.03 nmol或0.3 nmol現(xiàn)配現(xiàn)用,溶解于無(wú)菌生理鹽水),每8h一次。③空白對(duì)照組:選基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)的大鼠作為對(duì)照。
2實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的觀(guān)察:①一般情況的檢測(cè):每日觀(guān)察并記錄各組大鼠的精神狀態(tài)、尿量、食欲的變化及陰道開(kāi)口時(shí)間②體重和Lee's指數(shù)的檢測(cè):每周測(cè)一次體重
3、,記錄大鼠體重增長(zhǎng)曲線(xiàn),并測(cè)量其鼻尖至肛門(mén)的距離,即體長(zhǎng),Lee’s指數(shù)=[體重(g)]1/3/體長(zhǎng)(cm)×103,對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。③血脂的檢測(cè):各組大鼠禁食過(guò)夜,次日經(jīng)10%水合氯醛腹腔麻醉后,尾靜脈取血,離心后的血清分別進(jìn)行血脂檢測(cè)。④大鼠外周血中CD4+、CD8+水平的檢測(cè):幼年大鼠肥胖模型建立成功后24h取材,利用流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)各組大鼠外周血中CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞含量。
結(jié)果:①一般情況的變化:
4、與正常對(duì)照組相比,模型組和干預(yù)組大鼠在食欲方面表現(xiàn)出更強(qiáng)食欲性,進(jìn)食量稍高于正常對(duì)照組,而在精神狀態(tài)和尿量方面未見(jiàn)有明顯差異。各組大鼠未見(jiàn)陰道開(kāi)口。②體重和Lee’s指數(shù)的變化:在飼養(yǎng)大鼠45d后,高脂飼料喂養(yǎng)的模型組(420±38.7)和干預(yù)組(416±20.11;433±15.45)大鼠的體重超過(guò)基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)大鼠空白對(duì)照組(316±21.6)體重的20%,P<0.05,且統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義,且未發(fā)現(xiàn)有大鼠陰道開(kāi)口,提示食源性單純幼年大鼠肥
5、胖模型復(fù)制成功,同時(shí),高脂飼料喂養(yǎng)的模型組(286.56±27.5)和干預(yù)組(278.37±26.44;298.14±18.62)大鼠的Lee’s指數(shù)超過(guò)基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)大鼠空白對(duì)照組(240.32±25.5),P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③血脂的變化:模型組和干預(yù)組與對(duì)照組比較,血清TC、TG和LDL-C明顯升高,則HDL-C變化不明顯。④大鼠外周血中CD4+、CD8+水平的變化:高脂飼料喂養(yǎng)的模型組(20.58±1.77)大鼠外周血中C
6、D8+T淋巴細(xì)胞含量高于對(duì)照組(6.55±1.50)的大鼠CD8+T淋巴細(xì)胞含量,而模型組(32.23±0.74)CD4+T淋巴細(xì)胞所占百分比,與空白對(duì)照組(31.09±1.03)相比較,P>0.05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;干預(yù)組中隨著注射LXA4劑量的升高,大鼠外周血中CD8+T淋巴細(xì)胞含量(10.44±1.66;7.00±1.48)逐漸低于模型組(20.58±1.77),P<0.05,有統(tǒng)計(jì)意義,且LXA4.2組大鼠CD8+T淋巴細(xì)胞含量明
7、顯低于LXA4.1組,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各組CD4+T淋巴細(xì)胞所占百分比變化不明顯,P>0.05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與模型組(1.56±0.13)比較,干預(yù)組大鼠隨著注射LXA4的升高,其外周血中CD4+/CD8+細(xì)胞比值升高,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與對(duì)照組比較,差異不明顯。
結(jié)論:1成功復(fù)制出食源性幼年大鼠單純肥胖模型;2模型組幼年肥胖大鼠外周血中CD8+T淋巴細(xì)胞含量高,而CD4+/CD8+細(xì)胞比值降低,提示其
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