小腦皮質顆粒與分子層對面部刺激反應的場電位特征.pdf

1、外部信息通過爬行纖維和苔狀纖維傳入小腦皮層后，調節(jié)神經元活動，參與運動調節(jié)和運動學習，可是有關外部相關信息在哺乳動物小腦皮質中傳遞的細胞、突觸以及動力學機制還不明確。因此，本研究應用局部場電位記錄結合藥理學技術，研究小鼠小腦皮質顆粒層和分子層對感覺刺激三叉神經的場電位反應特征，明確感覺刺激誘發(fā)小鼠小腦皮層顆粒細胞層和分子層場電位反應動力學特征及藥理學機制。
　　實驗選用6-8周齡的昆明小鼠，經腹腔注射劑量為1.3 g/kg的烏拉坦

2、麻醉后，在小腦 Crus II小葉進行開顱術，開孔直徑約為1.5毫米，仔細除去該部位硬腦膜后，用泵給暴露部位的腦表面持續(xù)灌流人造腦脊液；面部刺激選用一定壓力的瞬間吹風刺激刺激相同側胡須墊（5-500 ms，50-60 psi），刺激裝置由電腦和膜片鉗記錄軟件控制 MASTER-8，并且與電生理信號記錄同步進行；場電位記錄部位選用顆粒與分子層，在記錄的電極內部灌裝20-30 ul人工腦脊液，電極電阻大概為4-6 MΩ；通過美國產膜片鉗之放

3、大器（Axopatch-200B）及Clampfit10.3數據收集軟件記錄面部刺激誘發(fā)顆粒和分子層的場電位反應；電生理實驗數據分析采用膜片鉗數據分析軟件（版本10.3）。各組數據均用《均數±標準誤》來表示，樣本數用n表示。相關數據的統(tǒng)計學的分析應用SPSS軟件（版本16.0），采用paired-T檢驗比較均數，當P小于0.05時，可以認為有顯著性差異。
　　本實驗有如下結果：
　　（1）在烏拉坦麻醉下，吹風刺激小鼠同側觸須

4、墊可誘發(fā)分子層產生場電位反應，表現(xiàn)為如下波形：（1）N1,瞬間負極性波；（2）P1，大的正極性波，N1平均的振幅值為0.13±0.06 mV，P1平均振幅值為0.36±0.08 mV。反應潛伏期的平均值為13.21±0.32 ms。吹風刺激結束可以誘發(fā)場電位反應（P2），但需要刺激時間大于60ms。
　?。?）A型GABA受體（GABAA）的阻斷劑一方面完全地阻斷了P1，并出現(xiàn)了N2，也就是第二個負波，表明信息經PF傳人后產生N1

5、，浦肯野細胞被抑制后產生由 GABAA受體介導的P1，GABAA受體的活性被阻斷后，面部刺激導致浦肯野細胞興奮并出現(xiàn)了N2。
　?。?）吹風刺激可誘發(fā)小腦Crus II區(qū)顆粒細胞層產生場電位反應，當刺激持續(xù)時間為5-10 ms時，可誘發(fā)單峰場電位反應。當刺激持續(xù)時間大于30 ms時，吹風刺激誘發(fā)雙峰反應，第一個峰值（N1）為刺激開始反應，其振幅的平均值為0.82±0.06 mV，具有“全和無”特征。第二峰值（N2）為刺激結束反應，

6、其振幅隨著刺激持續(xù)時間的增加而增大。
　?。?）小腦皮質顆粒層對面部刺激的反應表現(xiàn)為很高的反應頻率特性，刺激頻率從1 Hz-33 Hz的刺激串，可誘發(fā)顆粒細胞層反應，但隨著刺激頻率的增高，在第一個反應后可出現(xiàn)不同程度的反應壓抑現(xiàn)象。刺激頻率大于4 Hz時，第二個反應開始振幅顯著減?。≒<0.05）。
　?。?）腦表面灌流 TTX完全阻斷感覺刺激誘發(fā)顆粒細胞層場電位反應，N1峰值降至給藥前的4.6±1.31％（P<0.001）