Vero細胞培養(yǎng)流感病毒的研究.pdf

1、流行性感冒是人類至今尚不能有效控制的傳染病之一，其特點是在短期內突然爆發(fā)，迅速蔓延，造成不同程度的流行。除感染人外，流感病毒在動物體內也廣泛存在并能引起豬、雞、馬等動物發(fā)病，導致動物的大量死亡。雖然有少數(shù)抗病毒藥物對流感病毒的感染有一定療效，但并不能完全消除流感病毒給人類造成的威脅，因此疫苗接種仍然是預防流感的有力措施。目前，WHO積極支持和鼓勵以哺乳動物細胞為基質生產流感疫苗，本實驗對WHO指定的2006～2007年度疫苗株在 Ver

2、o細胞系上的增殖情況進行了考察，為研制以細胞為基質的流感疫苗提供了參考依據(jù)。第一部分不同類別的流感病毒毒株在Veto細胞上的傳代2006～2007年度WHO指定的北半球生產流感疫苗所用的標準毒株有三個型別，本實驗中，三個型別的流感病毒疫苗株被分別接種到144代Vero細胞上并在適合于流感病毒繁殖的最優(yōu)化條件下進行培養(yǎng)，三天之后收獲細胞裂解液，測定其血凝滴度，之后將第一代收獲的病毒液繼續(xù)接種Vero細胞，進行連續(xù)傳代，發(fā)現(xiàn)病毒收獲液的血凝

3、效價隨著傳代次數(shù)的增加而逐漸降低，當連續(xù)接種傳代四次之后，細胞裂解液中已經(jīng)檢測不到流感病毒了。上述的實驗證明了WHO指定的疫苗生產用流感毒株在Vero細胞上適應性差，不能有效繁殖，所以如果要利用Vero細胞作為基質來生產流感疫苗，還需要從其他方面進行探索和改進。 第二部分微載體培養(yǎng)Yero細胞及培養(yǎng)H3N2型流感病毒Yero細胞適應株的探索,微載體細胞培養(yǎng)技術是一種微載體與生物反應器結合的技術，現(xiàn)已廣泛應用于生物工程領域，成為大