殼聚糖、Ⅱ型膠原、PGA三種支架體外構(gòu)建組織工程軟骨的比較研究.pdf

1、目的：觀察兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞在殼聚糖、Ⅱ型膠原、PGA三種細(xì)胞支架上的生長(zhǎng)情況，以尋找更適合構(gòu)建組織工程軟骨的細(xì)胞支架材料。 方法：根據(jù)支架材料的不同，實(shí)驗(yàn)分為三組，分別為：殼聚糖組、Ⅱ型膠原組和PGA組，每組13個(gè)樣本。以多聚賴(lài)氨酸包埋殼聚糖、Ⅱ型膠原、PGA三種多孔海綿支架。分離培養(yǎng)兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，體外擴(kuò)增培養(yǎng)后種植于三種支架上。體外培養(yǎng)4周后，取出組織工程軟骨進(jìn)行大體標(biāo)本觀察，HE染色，檢測(cè)軟骨內(nèi)DNA含量、Ⅱ型膠原和GAG的

2、分泌量。 結(jié)果：體外培養(yǎng)4周發(fā)現(xiàn)，殼聚糖組的組織工程軟骨體積較大，厚度較厚，表面光滑，有光澤，彈性更接近正常軟骨組織，由殼聚糖支架構(gòu)建的工程軟骨，其厚度、色澤和彈性都優(yōu)于其他兩種支架。HE染色顯示，軟骨細(xì)胞在殼聚糖支架組內(nèi)增殖旺盛，軟骨細(xì)胞大部分呈圓形，排列緊密，軟骨細(xì)胞被分泌的大量細(xì)胞外基質(zhì)包圍，細(xì)胞外基質(zhì)融合成片，Ⅱ型膠原組軟骨細(xì)胞數(shù)次之，PGA組軟骨細(xì)胞數(shù)最少，細(xì)胞排列稀疏，軟骨細(xì)胞分泌的基質(zhì)較少，細(xì)胞外基質(zhì)呈網(wǎng)狀分布，未

3、融合成片。檢測(cè)組織工程軟骨內(nèi)DNA含量、Ⅱ型膠原和GAG的分泌量，結(jié)果顯示，殼聚糖組的DNA含量、Ⅱ型膠原和GAG的分泌量最高，Ⅱ型膠原組次之，PGA組最少。單因素方差分析顯示，三組支架的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，軟骨細(xì)胞在殼聚糖支架內(nèi)生長(zhǎng)良好，培養(yǎng)4周后仍能維持軟骨細(xì)胞的表型，其分泌Ⅱ型膠原和GAG的能力優(yōu)于其他兩種支架。 結(jié)論：殼聚糖支架更適合軟骨細(xì)胞的貼附生長(zhǎng)，有利于維持細(xì)胞表型，是較好的軟骨組織工程