三種支架用于牙周組織工程的體外實驗研究.pdf

1、目的
　　對單純殼聚糖、殼聚糖-絲素蛋白復合體、殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復合體這三種支架材料進行相關體外實驗研究，探索生物材料用于牙周組織工程的優(yōu)化方法，為牙周組織工程支架材料的選擇和進一步的動物體內(nèi)實驗提供實驗依據(jù)。
　　方法
　　采用二次冷凍干燥技術制備單純殼聚糖、殼聚糖-絲素蛋白復合體、殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復合體三種支架，研究三種支架的微觀結構、力學性能、體外降解性；同時將大鼠骨髓基質細胞分離培養(yǎng)、誘導后

2、，與三種支架材料體外共培養(yǎng)，從支架的細胞毒性、直接接觸實驗、細胞粘附率、細胞增殖活性等方面來評價三種支架材料的細胞相容性。
　　結果
　　1、三種支架的微觀結構、力學性能、體外降解性的檢測結果
　　相比單純殼聚糖和殼聚糖-絲素蛋白復合體支架而言，殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復合體支架大體形貌穩(wěn)定，冰凍切片光鏡下測量的孔徑值、孔隙率最大，分別為0.30±0.10mm、81.68±8.71％；壓縮強度最大，為1.44±0.9

3、6MPa；體外降解率第1、2周時三種支架相近，到第3、4周時，單純殼聚糖和殼聚糖-絲素蛋白復合體支架降解速率加快，分別為67.05±1.70%、71.65±2.48%，而殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復合體支架的降解速率減慢，為58.06±1.99%，但與組織再生速度相匹配。
　　2、支架的細胞毒性檢測結果
　　MTT法檢測到的殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復合體支架各時間點各濃度浸提液對L-929（小鼠皮膚成纖維細胞）的相對增殖率

4、均在75%以上,毒性分級為0級或1級，無細胞毒性，生物相容性好，可作為體內(nèi)植入材料。
　　3、三種支架的細胞相容性檢測結果
　　掃描電鏡下，細胞在三種支架內(nèi)生長狀態(tài)均良好，形態(tài)飽滿，伸出多個突起粘附于材料表面,在支架的孔隙內(nèi)分散或集中分布。相比單純殼聚糖和殼聚糖-絲素蛋白復合體支架而言，殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣復合體支架細胞粘附率和細胞增殖活性更高，能促進骨髓基質細胞的粘附與增殖。
　　結論
　　利用不同性質的