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文檔簡介
1、【目的】:研究SD大鼠腦內(nèi)藍(lán)斑核、杏仁核及海馬三者之間的神經(jīng)纖維連接,為青光眼腦功能網(wǎng)絡(luò)的存在奠定解剖學(xué)基礎(chǔ)。
【方法】:將60只雄性SD大鼠隨機(jī)分成三組,每組20只。采用腦立體定位技術(shù),用微量加樣器分別在藍(lán)斑核(A組)、杏仁核(B組)、海馬(C組)導(dǎo)入0.2μL逆行性神經(jīng)示蹤劑熒光金(2%FG)。大鼠飼養(yǎng)7天后,進(jìn)行4%多聚甲醛心臟灌注腦組織固定,取出腦組織,冰凍切片后,用熒光顯微鏡觀察每組動(dòng)物藍(lán)斑核、杏仁核及海馬處腦組織切
2、片的FG標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞分布,并將鄰近切片進(jìn)行尼氏染色,以判斷核團(tuán)定位是否準(zhǔn)確。
【結(jié)果】:A組藍(lán)斑核組共20只SD大鼠,飼養(yǎng)7天后,存活16只(4只死于麻醉或顱內(nèi)感染),其中經(jīng)尼氏染色確定定位準(zhǔn)確者有8只(8/16),另外8只定位不準(zhǔn)確,予以剔除;B組杏仁核組共20只SD大鼠,7天后存活18只(2只死亡),其中定位準(zhǔn)確者有10只(10/18),另外8只經(jīng)尼氏染色確定定位不準(zhǔn)確,予以剔除;C組海馬組共20只SD大鼠,7天后,存活1
3、8只(2只死亡),經(jīng)尼氏染色確定定位準(zhǔn)確者有12只(12/18),另外有6只經(jīng)尼氏染色確定定位不準(zhǔn)確,予以剔除。用倒置熒光顯微鏡在紫外光下觀察發(fā)現(xiàn),藍(lán)斑核組(A組)中定位準(zhǔn)確的共8只,且在海馬處及杏仁核處均未觀察到熒光;杏仁核組(B組)中定位準(zhǔn)確的共10只,其中有8只(8/10)在藍(lán)斑核處可觀察到逆行性神經(jīng)示蹤劑FG標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞,另外2只在藍(lán)斑核處未見FG標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞;而在海馬層面均未見到FG標(biāo)記的神經(jīng)元。海馬組(C組)中定位準(zhǔn)確的
4、共12只,其中有10只(10/12)可于杏仁核部位觀察到逆行性神經(jīng)示蹤劑FG標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的熒光,另外2只未觀察到熒光;有8只(8/12)在藍(lán)斑核處觀察到FG標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的熒光,另外4只未觀察到熒光。
【結(jié)論】:熒光金是一種逆行性神經(jīng)示蹤劑。A組藍(lán)斑核組于杏仁核處及海馬處均未觀察到熒光,說明杏仁核及海馬均不存在投向藍(lán)斑核處的神經(jīng)纖維。B組杏仁核組在海馬處未觀察到熒光,在藍(lán)斑核處觀察到熒光,說明藍(lán)斑核有神經(jīng)纖維投射至杏仁
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