杏仁核點(diǎn)燃耐藥性癲癇大鼠海馬NMDAR1和NMDAR2B亞單位的表達(dá).pdf

1、目的：建立耐苯妥因鈉及苯巴比妥鈉杏仁核點(diǎn)燃大鼠耐藥癲癇模型，觀察耐藥性癲癇大鼠海馬組織中N-甲基-D-天冬氨酸受體NR1、NR2B亞單位表達(dá)的變化，探討耐藥癲癇的可能機(jī)制。
　　方法：選擇100只健康的雄性Wistar大鼠，通過杏仁核慢點(diǎn)燃刺激，建立癲癇模型后，分別給予苯妥因鈉及苯巴比妥鈉腹腔注射各三次，1小時(shí)后測(cè)量后放電閾值（Afterdischarge threshold，ADT），ADT平均值不增加或增高小于20％為耐藥癲癇

2、組，ADT增高20%以上納入藥物敏感組，另選取8只正常大鼠為正常對(duì)照組。三組模型建立成功后立即處死大鼠，取海馬組織，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、蛋白免疫印記方法檢測(cè)NMDAR1、NMDAR2B的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.模型制作情況：100只健康雄性Wistar大鼠，選取8只為正常對(duì)照，剩余大鼠建立癲癇點(diǎn)燃模型。完成點(diǎn)燃72只，成功點(diǎn)燃45只，發(fā)作級(jí)別均為5級(jí)，點(diǎn)燃率62.5%。45只癲癇大鼠經(jīng)過苯妥因鈉及苯巴比妥鈉兩種一線抗癲癇藥物篩選，

3、篩選出耐藥性癲癇大鼠8只，耐藥率17.7%，成功建立了耐苯妥因鈉及苯巴比妥鈉的杏仁核點(diǎn)燃癲癇大鼠模型。
　　2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR：耐藥癲癇組海馬NR1、NR2B mRNA的相對(duì)表達(dá)量均高于對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。藥物敏感組 NR1、NR2B mRNA的相對(duì)表達(dá)量比正常大鼠海馬稍高，未見顯著差異（P>0.05）。
　　3.蛋白免疫印記：耐藥癲癇組海馬NR1、NR2B的蛋白相對(duì)表達(dá)量均高于對(duì)照組和藥物敏感