耐藥性癲癇模型海馬組織GAD67、SV2A表達(dá)變化.pdf

1、目的：建立大鼠耐藥性癲癇模型，并研究海馬組織谷氨酸脫羧酶67及突觸囊泡蛋白2A變化，探討耐藥性癲癇發(fā)病機(jī)制。
　　方法：65只雄性SD大鼠通過杏仁核電刺激，建立慢點(diǎn)燃大鼠模型，分別行苯妥英鈉及苯巴比妥腹腔注射，1小時(shí)后測(cè)后放電閾值（ADT），以ADT變化為標(biāo)準(zhǔn)，篩選出耐藥大鼠，分為藥物敏感組和耐藥模型組兩組，分析其行為學(xué)表現(xiàn)和分析其腦電圖信號(hào)。取海馬組織行熒光定量PCR、免疫組化檢測(cè)谷氨酸脫羧酶67及突觸囊泡蛋白2A變化。

2、　　結(jié)果：
　　1、行為學(xué)變化點(diǎn)燃過程可見大鼠由靜止、閉眼、胡須動(dòng)、面部抽搐發(fā)展到點(diǎn)頭樣，一側(cè)至雙側(cè)前肢抬起、陣攣、跌倒，高度模擬了人類復(fù)雜部分性發(fā)作。
　　2、腦電變化：①正常大鼠腦電無明顯變化；②點(diǎn)燃成功大鼠出現(xiàn)高波幅棘慢波或棘尖波發(fā)放；耐藥模型組大鼠波幅高，頻率更快，持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)；予點(diǎn)燃刺激15天后，有自發(fā)癇性放電。
　　3、ADT值比較耐藥模型組較藥物敏感組ADT高，用藥前后ADT比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而藥物敏

3、感組ADT用藥前后比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4、熒光定量 PCR檢測(cè) GAD67mRNA、SV2AmRNA耐藥模型組 GAD67mRNA、SV2AmRNA表達(dá)均低于藥物敏感組，GAD67mRNA兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，SV2AmRNA在兩組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5、GAD67、SV2A病理切片：①觀察海馬CA1區(qū)，耐藥模型組光鏡下可見神經(jīng)元排列松散紊亂，輪廓不清，變性和壞死，藥物敏感組改變較輕。②耐藥模型組GAD67陽性細(xì)胞

4、數(shù)目表達(dá)較少，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。耐藥模型組 SV2A陽性細(xì)胞數(shù)較低，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③耐藥模型組 GAD67平均透光率較高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。耐藥模型組SV2A平均透光率較高，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　1、通過苯妥英鈉和苯巴比妥兩類一線抗癲癇藥物成功建立耐藥性癲癰模型，是理想的難治性顳葉癲癇模型。
　　2、GAD67和SV2A與GABA的合成、傳遞和釋放環(huán)節(jié)密切相關(guān)。
　　3、耐藥癲癇模型海