EpCAM基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)與基因表達(dá)關(guān)系研究.pdf

1、ne77Z分《；蝙0M$001022爺如穩(wěn)黲博士學(xué)位論文EpCAM基因啟動(dòng)予區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)與基因表達(dá)關(guān)系研究i々☆kt冒芘孚”娃￡＆一R粕=笪!墮苧墊業(yè)Z稱(chēng)人體解剖與組織胚胎學(xué)中山大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要有DNA堿基序列的改變，但是卻可以引起基因表達(dá)的改變。表觀遺傳學(xué)的改變引起的基因表達(dá)的改變主要表現(xiàn)在三個(gè)方面：DNA修飾，組蛋白修飾和RNA干擾。目前腫瘤表觀遺傳學(xué)的研究中以DNA甲基化和去甲基化為研究的熱點(diǎn)之一。在腫瘤的發(fā)生中，

2、出現(xiàn)基因組的整體去甲基化，和部分區(qū)段的高甲基化，這些高甲基化和低甲基化都可以出現(xiàn)在基因啟動(dòng)子區(qū)域的CpG島。抑癌基因啟動(dòng)子區(qū)域的CpG島甲基化之后，會(huì)出現(xiàn)基因表達(dá)的降低，甚至失表達(dá)，抑制腫瘤發(fā)生的功能降低，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生；反之，在一些癌基因啟動(dòng)子區(qū)域的CpG島出現(xiàn)去甲基化后，卻可以誘導(dǎo)基因表達(dá)增高，進(jìn)一步加快腫瘤的發(fā)生發(fā)展。上皮細(xì)胞黏附分子基因，在正常的消化道上皮表達(dá)較低甚至不表達(dá)，但是在上皮出現(xiàn)異常增生和永生化時(shí)，該基因卻出現(xiàn)表達(dá)

3、的異常增高。目前研究表明EpCAM基因?qū)τ谀[瘤的發(fā)生具有促進(jìn)作用，可以上調(diào)cmyc癌基因的表達(dá)。研究表明：抑制上皮細(xì)胞黏附分子基因的表達(dá)可以有效抑制腫瘤的生長(zhǎng)；對(duì)于結(jié)腸癌的來(lái)說(shuō)，EpCAM分子的抗體，可以有效的治療腫瘤，說(shuō)明該分子在腫瘤的發(fā)生中有著重要作用。但是該基因在腫瘤中高表達(dá)的機(jī)制仍然不清。該基因的高表達(dá)，是否也存在表觀遺傳學(xué)的改變?cè)谠摶騿?dòng)子區(qū)是否存在CpG島該基因的表達(dá)是否有關(guān)我們首先通過(guò)網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)，查找上皮細(xì)胞黏附分子基因

4、轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游1500bp和下游1000bp的基因序列，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)分析該段基因序列，發(fā)現(xiàn)在該段基因序列中確實(shí)存在著一個(gè)CpG島，并且跨度較長(zhǎng)，但是對(duì)于其在腫瘤中甲基化狀態(tài)研究以及和基因表達(dá)的關(guān)系未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。在本研究中，通過(guò)BSP(bisulfitesequencingPCR)技術(shù)，分析在上皮細(xì)胞黏附分子高表達(dá)和不表達(dá)細(xì)胞中該基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化狀態(tài)，研究CpG島甲基化和該基因表達(dá)的關(guān)系和CpG島的甲基化狀態(tài)，探討上皮細(xì)胞黏附分