甲狀腺腫瘤組織中RASSFIA基因啟動子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)的研究.pdf

1、目的：最近研究發(fā)現(xiàn)抑癌基因啟動子區(qū)異常甲基化是基因沉默的主要機制。DNA甲基化所導致的抑癌基因的失活在甲狀腺腫瘤的的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用,本研究旨在研究甲狀腺腫瘤中。Ras相關結構域家族1基因轉錄本A(RASSF1A)啟動子區(qū)異常甲基化狀態(tài),以及與患者的臨床病理學特征之間的關系,探討RASSF1A啟動子區(qū)異常甲基化狀態(tài)與甲狀腺腫瘤發(fā)生發(fā)展的關系,并為其早期分子診斷、預后監(jiān)測和靶基因治療提供客觀依據(jù)。 方法：本研究收集198

2、6～2007年的石蠟包埋良惡性腫瘤組織94例(其中乳頭狀癌61例,濾泡性癌15例,髓樣癌2例,未分化癌1例,甲狀腺腺瘤15例),以及正常甲狀腺組織10例,采用美國Ghemicon公司CpGenomeDNA修飾試劑盒對組織DNA進行亞硫酸氫鹽修飾,使用甲基化特異性聚合酶鏈反應(MSP)檢測手術切除甲狀腺組織中RASSF1A啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)。 結果： 1.甲狀腺良惡性腫瘤中存在RASSF1A啟動子區(qū)甲基化率67％(63/9

3、4),其中甲狀腺乳頭狀癌(PTC)中RASSF1A啟動子區(qū)甲基化率為68.9％(42/61),甲狀腺濾泡癌(FTC)RASSF1A啟動子區(qū)甲基化率為733％(11/15),甲狀腺腺瘤RASSF1A啟動子區(qū)甲基化率為46.7％(7/15),10例正常甲狀腺組織中無一例存在RASSF1A啟動子高甲基化(0/10)。 2.RASSF1A基因甲基化陽性率在腫瘤組織中明顯高于正常甲狀腺組織,差異有統(tǒng)計學意義；兩種不同的癌組織類型(PTC和

4、FTC)中RASSFIA基因啟動子區(qū)的甲基化陽性率差異無顯著性；癌與甲狀腺腺瘤之間甲基化陽性率差異無顯著性。 3.在76例甲狀腺癌(61例PTC和15例FTC)中,RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化在患者性別、淋巴結轉移及腫瘤復發(fā)之間差異無統(tǒng)計學意義,但是,RASSF1A基因啟動子的高甲基化與年齡相關,40歲以上患者的甲狀腺癌組織顯著高于小于40歲的患者。 結論： 1.RASSF1A基因啟動子區(qū)在甲狀腺腫瘤中處于高

5、甲基化狀態(tài),其甲基化程度明顯高于正常甲狀腺組織,提示RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化是甲狀腺腫瘤組織中常見的分子生物學事件,與甲狀腺腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。 2.RASSF1A基因啟動子區(qū)在甲狀腺良性腫瘤中有較高的甲基化,并且與甲狀腺惡性腫瘤之間甲基化程度沒有明顯差異,提示RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化可能是甲狀腺腫瘤發(fā)生中的早期生物學事件。 3.RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化與甲狀腺癌患者的年齡有關,提示RASSF

6、1A甲基化在青年和中老年甲狀腺癌中可能具有不同的功能,RASSF1A基因甲基化可能是甲狀腺癌的一個預后指標。 4.甲狀腺腫瘤中RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)的檢測,為進一步深入研究去甲基化治療提供了依據(jù),去甲基化恢復抑癌基因RASSF1A的功能有可能成為甲狀腺靶基因治療的手段之一。 5.甲基化特異性的PCR方法用于腫瘤石蠟標本中啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)檢測具有高效、敏感、特異的特點,RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化有望成