HMGB1在內(nèi)毒素大鼠急性肺損傷肺血管重構(gòu)中的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　 探討HMGB1在脂多糖誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷肺血管重構(gòu)中的作用機(jī)制，為內(nèi)毒素急性肺損傷的臨床治療提供進(jìn)一步的理論基礎(chǔ)。
　　 材料與方法:
　　 健康雄性成年wistar大鼠30只，體重160-220g，隨機(jī)分為3組，每組10只，分別為:對(duì)照組（C組）、LPS模型組（L組）、HMGB1中和抗體處理組（H組）。C組大鼠尾靜脈恒速注射0.9％NaCl(1mg/kg)、L組大鼠尾靜脈注射同等劑量LPS，均在

2、1小時(shí)注射完畢。H組大鼠在注射同等劑量LPS后12h/24h/48h分別尾靜脈注射HMGB1中和抗體(2mg/kg)。各組大鼠均在第一次注射藥物72h后處死。應(yīng)用HE組織染色觀察各組大鼠與支氣管伴行的肺小動(dòng)脈中膜厚度及面積改變，組織化學(xué)染色法半定量每組大鼠肺小動(dòng)脈中膜平滑肌細(xì)胞PCNA、bax、bcl-2的表達(dá)情況，RT-PCR法定量測(cè)定每組大鼠肺組織HMGB1、bax、bcl-2mRNA的表達(dá)，western-blot法測(cè)定每組大鼠肺

3、組織HMGB1、bax、bcl-2蛋白含量變化。
　　 結(jié)果:
　　 (1)組織病理學(xué)染色顯示，與C組、H組相比，L組的肺小動(dòng)脈中膜厚度百分比明顯增加(P＜0.05);H組與C組比較，肺小動(dòng)脈中膜厚度百分比無(wú)差異(P＞0.05)。(2)組織化學(xué)染色法顯示，PCNA、Bcl-2、Bax在C組、L組、H組肺小動(dòng)脈中膜均有表達(dá)，棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)。(3)L組的肺小動(dòng)脈中膜PASMC增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增加，與

4、C組相比，增殖指數(shù)顯著增加(P＜0.05);H組較L組明顯降低(P＜0.05);C組與L組相比無(wú)明顯差異(P＞0.05)。(4)實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定得出，L組HMGB1mRNA含量較C組、H組比較顯著升(P＜0.05);L組BaxmRNA的表達(dá)相較于C組明顯下降(P＜0.05);經(jīng)抗體處理后，H組BaxmRNA的表達(dá)相較于L組明顯增加(P＜0.05);與C組、H組比較，L組Bcl-2mRNA的表達(dá)明顯增加(P＜0.05);(5)蛋白印

5、跡法表明，Bax蛋白表達(dá)在C組及H組均高于L組(P＜0.05);Bcl-2蛋白表達(dá)在C組及H組均低于L組(P＜0.05);HMGB1蛋白含量在L組顯著高于C組及C組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、LPS誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷過(guò)程中存在小動(dòng)脈構(gòu)型重建;
　　 2、HMGB1可能通過(guò)下調(diào)Bax基因表達(dá)，上調(diào)Bcl-2基因的表達(dá)，誘導(dǎo)肺小動(dòng)脈上PASMC的增殖，促進(jìn)內(nèi)毒素急性肺損傷肺血管重構(gòu);