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文檔簡介
1、目的:
建立兔VX2乳腺癌動物模型,獲得f-MSCT評價未經(jīng)治療的兔VX2乳腺癌血管生成特點,為本研究的接續(xù)實驗提供依據(jù)和基礎(chǔ);應(yīng)用免疫組化和Western blot兩種方法評價兔VX2乳腺癌動物模型恩度、新輔助化療及兩種方案聯(lián)合治療的抗血管生成效果,初步探討恩度、新輔助化療和兩種方案聯(lián)合治療的抗血管生成治療的原因;用f-MSCT評價恩度、新輔助化療和兩種方案聯(lián)合治療的抗血管生成治療效果,尋找評估恩度、新輔助化療和兩種方案
2、聯(lián)合治療的抗血管生成治療療效的方法。
方法:
用VX2瘤株制備瘤細胞懸液注射在2只新西蘭大白兔后肢股內(nèi)側(cè)區(qū)肌肉內(nèi)制成傳代兔,2周時于注射部位手術(shù)摘取已經(jīng)形成的實性腫瘤,切取腫瘤邊緣生長旺盛魚肉樣組織,剪成直徑0.5mm~1mm制成組織塊懸液。麻醉狀態(tài)下將組織塊懸液接種到94只純種雌性新西蘭白兔(月齡3~4個月;體重2.0~2.5 kg)乳腺區(qū),種瘤后2周隨機選取16只瘤兔進行論文第一部分實驗研究:應(yīng)用GE l
3、ightspeed16 CT灌注掃描,利用Perfusion3軟件中的去卷積模型來計算四種灌注參數(shù)的灌注值即血流量(BF)、血容積(BV)、平均通過時間(MTT)和表面通透性(PS);之后16只荷瘤兔取瘤組織進行免疫組化檢測MVD和VEGF表達。將剩余的78只荷瘤兔隨機分四組用于論文第二、三部分實驗研究:設(shè)對照組為生理鹽水組18只給予生理鹽水治療,恩度組20只給予單純恩度治療:新輔助化療組20只給予CEF(CTX,EPI,5-Fu)方案
4、治療:聯(lián)合治療組20只行恩度加新輔助化療兩種方案聯(lián)合治療。論文第二部分于各組治療后CT灌注成像之后所有荷瘤兔手術(shù)取瘤組織,用免疫組化法檢測MVD和VEGF,用Westernblot法檢測VEGF的蛋白表達。論文第三部分各組荷瘤兔治療前和治療兩周后分別行CT灌注成像檢測BF、BV、MTT和PS。應(yīng)用SPSS13.0軟件包采用t檢驗、方差分析、析因分析及相關(guān)分析等方法進行統(tǒng)計學(xué)處理,P<0.05水平為有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)果:
5、r> 1、論文第一部分16只兔種瘤2周后成瘤率達100%。兔VX2乳腺癌模型腫瘤CT灌注參數(shù).BF、BV和PS均值明顯高于肌肉組織,而MTT低于肌肉組織;兩組間的BF、BV、MTT及PS具有顯著性差異(P<0.01);其免疫組化檢測MVD平均值為283.45±8.04;VEGF表達為7.33±0.27;本組實驗中兔VX2乳腺癌組織的CT灌注參數(shù)BF、BV和PS與MVD和VEGF表達間呈正相關(guān),而MTT與MVD和VEGF表達之間呈負
6、相關(guān)。
2、論文第二部分本部分免疫組化檢測MVD和VEGF表達結(jié)果:新輔助化療組、恩度組、聯(lián)合治療組和生理鹽水組的MVD和VEGF兩兩比較均有顯著性差異(P<0.01),表現(xiàn)為聯(lián)合治療組均值最低,恩度組居中,新輔助化療組較高,生理鹽水組最高,表明生理鹽水組、新輔助化療組、恩度組及聯(lián)合治療組MVD和VEGF有依次遞減的趨勢。析因分析發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療組的作用最強,表明恩度和新輔助化療藥聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用;Western blot
7、檢測結(jié)果:生理鹽水組、新輔助化療組、恩度組及聯(lián)合治療組VEGF蛋白表達的灰度值依次減低。
3、論文第三部分生理鹽水組、新輔助化療組、恩度組及聯(lián)合治療組治療后CT。灌注獲得的參數(shù)BF、BV、PS均值較治療前明顯減低,而MTT均值較治療前增大,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);方差分析和q檢驗進行對比分析,結(jié)果表明新輔助化療組、恩度組、聯(lián)合治療組和生理鹽水組的BF、BV、MTT及PS兩兩比較均有顯著性差異(P<0.01),表現(xiàn)
8、為聯(lián)合治療組BF、BV和PS均值最低,MTT均值最高;恩度組BF、BV和PS均值高于聯(lián)合治療組,MTT均值低于聯(lián)合治療組;而新輔助化療組BF、BV和PS均值高于恩度組,MTT均值低于恩度組;以上三組BF、BV和PS均值均低于生理鹽水組,MTT高于生理鹽水組。表明生理鹽水組、新輔助化療組、恩度組、聯(lián)合治療組的BF、BV和PS均值依次遞減,而MTT均值依次增高。各組治療后的灌注參數(shù)BF、BV、PS均值與其治療后MVD和VEGF表達的均值呈正
9、相關(guān),而MTT均值與治療后MVD和VEGF表達的均值呈負相關(guān)(P<0.01)。
結(jié)論:
1、兔VX2乳腺癌動物模型可以作為CT灌注評價腫瘤血管生成的實驗研究,f-MSCT可以評價未經(jīng)治療的兔VX2乳腺癌腫瘤血管生成。
2、恩度單藥治療兔VX2乳腺癌,可使腫瘤內(nèi)MVD和VEGF表達顯著減低,發(fā)揮抗血管生成作用;恩度與CEF新輔助化療方案聯(lián)合應(yīng)用治療兔VX2乳腺癌產(chǎn)生了抗血管生成的協(xié)同作用;CEF新
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