5-6腎切除對(duì)小鼠心臟原位c-kit+心肌干細(xì)胞數(shù)量和功能的影響.pdf

1、背景：
　　 在各種急性和慢性心臟疾病時(shí)均存在不同程度的干、祖細(xì)胞數(shù)量和功能損傷，而干、祖細(xì)胞數(shù)量減少和/或功能受損會(huì)導(dǎo)致心肌細(xì)胞和冠脈系統(tǒng)再生障礙，引起心功能受損。但是，終末期腎病時(shí)心肌干細(xì)胞的變化情況仍是未知。
　　 方法：
　　 實(shí)驗(yàn)分組如下：將42只10周齡C57雄性小鼠隨機(jī)分為3組：正常對(duì)照組(n=6)，假手術(shù)組(n=18)，5/6腎切除組(n=18)。術(shù)后12周處死小鼠，收集血液、心臟標(biāo)本。分離c-k

2、it+心肌干細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組小鼠心臟中c-kit+心肌細(xì)胞的數(shù)量。將分離鑒定后的c-kit+心肌干細(xì)胞做原代培養(yǎng)，用免疫組織化學(xué)法觀察各組細(xì)胞凋亡和DNA過(guò)氧化損傷的情況。用0.3％H2O2刺激正常對(duì)照組小鼠來(lái)源、以及5/6腎切除小鼠來(lái)源的c-kit+心肌干細(xì)胞，觀察它們對(duì)氧化應(yīng)激的耐受能力。分別用正常培養(yǎng)基(DMEM+10％FBS)、尿毒癥血漿培養(yǎng)基(DMEM+10％尿毒癥大鼠血漿)培養(yǎng)健康小鼠來(lái)源的c-kit+心肌干細(xì)胞，

3、觀察不同培養(yǎng)基中c-kit+心肌干細(xì)胞的凋亡和過(guò)氧化損傷情況。Westernblotting方法觀察不同培養(yǎng)基中c-kit+心肌干細(xì)胞促血管生成因子angiopioetin、HGF、IGF-1、VEGF的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 在5/6腎切除術(shù)后12周，小鼠的血清肌酐和血尿素氮顯著升高。5/6腎切除組小鼠的c-kit+心肌干細(xì)胞數(shù)量較假手術(shù)組明顯下降。在原代培養(yǎng)的c-kit+心肌干細(xì)胞，5/6腎切除組的凋亡及TU