柔木丹顆?？垢卫w維化作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：從動物模型入手，從血清學(xué)及病理組織學(xué)等不同方面上較系統(tǒng)地研究肝纖維化降解的機(jī)制，了解中藥作用環(huán)節(jié)，尋找中藥抗肝纖維化的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為臨床應(yīng)用提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：將清潔級雄性SD大鼠80只，體重體重84-165g。隨機(jī)分為正常對照組10只和肝纖維造模組70只，大鼠免疫性肝纖維化模型制備按王寶恩等所采用的方法加以改進(jìn)，給肝纖維化模型組予人血清白蛋白致敏大鼠后，再予尾靜脈攻擊2m。從肝纖維化模型組大鼠中隨機(jī)取出8只，經(jīng)心臟

2、灌注后取肝，迅速投入液氮，之后轉(zhuǎn)入-70°C冰箱保存，觀察肝纖維形成情況。造模成功后，再隨機(jī)分為柔木丹顆粒預(yù)防組、柔木丹顆粒治療組、軟肝片對照組、不予任何藥物治療模型組等，共治療8w。各組大鼠均作停藥處理。采用ELISA方法，測定血清TGF-β1、MMP-13水平；采用免疫組織化學(xué)SP法檢測肝組織TGF-β1、MMP-13、TIMP-1蛋白、Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白及HE染色、Masson染色觀察肝纖維組織增生情況。 結(jié)果：柔木丹顆粒

3、能有效降低肝纖維化大鼠血清TGF-β1的水平，血清MMP-13在纖維化大鼠中較正常大鼠顯著下降，在柔木丹顆粒治療組和軟肝片治療組中均較模型組高，但經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)差異不顯著，P＞0.05。Ⅰ型及Ⅲ型膠原蛋白經(jīng)計(jì)算機(jī)圖像灰度掃描數(shù)字轉(zhuǎn)化后，預(yù)防組Ⅰ型膠原蛋白平均值為98.2+24.04；Ⅲ型膠原蛋白平均值為88.9+18.28。與模型組對比行t檢驗(yàn)，P＜0.05有顯著性差異；與軟肝片組對比行t檢驗(yàn)，P＜0.05有顯著性差異。治療組Ⅰ型膠

4、原蛋白平均值為184.2+40.2；Ⅲ型膠原蛋白平均值為175+42.2。與模型組對比行t檢驗(yàn)，P＜0.05有顯著性差異；與軟肝片組對比，雖Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白數(shù)值較其小，但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P＞0.05，兩組之間無明顯差異。軟肝片組Ⅰ型膠原蛋白平均值為287.6+26.56；Ⅲ型膠原蛋白平均值為291.6+43.72。與模型組對比行t檢驗(yàn)，P＜0.05有顯著性差異。而TGF-β1表達(dá)模型組較之正常組明顯增強(qiáng)(P＜0.01)。MMP-13表達(dá)

5、在造模后較正常對照組低(P＜0.01)，但在模型各組中表達(dá)趨于平穩(wěn)。TIMP-1蛋白表達(dá)模型組與正常對照組比較持續(xù)升高(P＜0.01)。 結(jié)論：在實(shí)驗(yàn)性免疫性肝纖維化大鼠，柔木丹顆?？山档推溲錞GF-β1的水平；血清MMP-13在纖維化大鼠中較正常大鼠顯著下降，在柔木丹顆粒治療組和軟肝片治療組中均較模型組高。 應(yīng)用柔木丹顆粒治療后的大鼠，Ⅰ、Ⅲ型膠原含量減少，表達(dá)減弱。柔木丹顆粒能有效降低肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1