轉腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的骨髓基質(zhì)細胞移植治療老年性癡呆大鼠的實驗研究.pdf

1、目的:探討轉染腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor ，BDNF)的骨髓基質(zhì)細胞(bone marrow stromal cells BMSCs)對老年性癡呆(Alzheimer`s disease，AD)大鼠行為學和海馬膽堿乙酰轉移酶活性和海馬CA1區(qū)ChAT神經(jīng)元的影響。
　　 方法:篩選健康SD大鼠隨機分為4組：對照組、模型組、骨髓基質(zhì)細胞移植、轉BDNF基因的骨髓基質(zhì)細胞移

2、植組，每組16只大鼠，采用腹腔注射D-半乳糖和海馬定向注射凝聚態(tài)Aβ1 - 40制備AD模型。用陽離子聚合物介導法將BDNF基因轉染到大鼠骨髓基質(zhì)細胞中，免疫細胞化學法檢測轉基因骨髓基質(zhì)細胞基因表達情況。立體定向法將Brdu標記的骨髓基質(zhì)細胞移植到老年癡呆大鼠的雙側海馬CA1區(qū)，用Y型迷宮測試細胞移植后7d、14d、28d各組大鼠行為學改變，比色法測定各組大鼠海馬膽堿乙酰轉移酶活性變化，免疫組化法觀察各組海馬CA1區(qū)ChAT神經(jīng)元的變化

3、情況。
　　 結果:骨髓基質(zhì)細胞轉BDNF基因24小時后就有BDNF蛋白的表達。細胞移植后7d、14d、28d模型組與對照組比較學習和記憶的能力顯著下降；和模型組比較骨髓基質(zhì)細胞移植組及轉基因骨髓基質(zhì)細胞細胞移植組學習記憶能力顯著提高。轉基因骨髓基質(zhì)細胞移植入AD大鼠海馬28d在宿主腦內(nèi)存活，并表達基因產(chǎn)物。ChAT活性測定結果顯示模型組海馬膽堿乙酰轉移酶活性顯著降低, 轉基因骨髓基質(zhì)細胞移植組大鼠海馬膽堿乙酰轉移酶活性較模型組

4、及骨髓基質(zhì)細胞移植組顯著提高(P<0.05)；免疫組化結果顯示模型組大鼠海馬CA1區(qū)ChAT、BDNF陽性細胞較模型組顯著減少(P<0.05)，轉基因骨髓基質(zhì)細胞移植入AD大鼠海馬28d后海馬CA1區(qū)ChAT、BDNF陽性細胞數(shù)量較模型組顯著增多（P<0.05）。
　　 結論:轉染BDNF基因的骨髓基質(zhì)細胞移植后能在AD大鼠海馬區(qū)長期存活，可以促進損傷區(qū)膽堿能神經(jīng)元的修復，提高AD大鼠海馬膽堿乙酰轉移酶活性，改善AD大鼠的學習和