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1、目的:探討轉(zhuǎn)染腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor ,BDNF)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells BMSCs)對(duì)老年性癡呆(Alzheimer`s disease,AD)大鼠行為學(xué)和海馬膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶活性和海馬CA1區(qū)ChAT神經(jīng)元的影響。
方法:篩選健康SD大鼠隨機(jī)分為4組:對(duì)照組、模型組、骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植、轉(zhuǎn)BDNF基因的骨髓基質(zhì)細(xì)胞移
2、植組,每組16只大鼠,采用腹腔注射D-半乳糖和海馬定向注射凝聚態(tài)Aβ1 - 40制備AD模型。用陽(yáng)離子聚合物介導(dǎo)法將BDNF基因轉(zhuǎn)染到大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞中,免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因骨髓基質(zhì)細(xì)胞基因表達(dá)情況。立體定向法將Brdu標(biāo)記的骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植到老年癡呆大鼠的雙側(cè)海馬CA1區(qū),用Y型迷宮測(cè)試細(xì)胞移植后7d、14d、28d各組大鼠行為學(xué)改變,比色法測(cè)定各組大鼠海馬膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶活性變化,免疫組化法觀察各組海馬CA1區(qū)ChAT神經(jīng)元的變化
3、情況。
結(jié)果:骨髓基質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)BDNF基因24小時(shí)后就有BDNF蛋白的表達(dá)。細(xì)胞移植后7d、14d、28d模型組與對(duì)照組比較學(xué)習(xí)和記憶的能力顯著下降;和模型組比較骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植組及轉(zhuǎn)基因骨髓基質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞移植組學(xué)習(xí)記憶能力顯著提高。轉(zhuǎn)基因骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植入AD大鼠海馬28d在宿主腦內(nèi)存活,并表達(dá)基因產(chǎn)物。ChAT活性測(cè)定結(jié)果顯示模型組海馬膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶活性顯著降低, 轉(zhuǎn)基因骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植組大鼠海馬膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶活性較模型組
4、及骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植組顯著提高(P<0.05);免疫組化結(jié)果顯示模型組大鼠海馬CA1區(qū)ChAT、BDNF陽(yáng)性細(xì)胞較模型組顯著減少(P<0.05),轉(zhuǎn)基因骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植入AD大鼠海馬28d后海馬CA1區(qū)ChAT、BDNF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量較模型組顯著增多(P<0.05)。
結(jié)論:轉(zhuǎn)染BDNF基因的骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植后能在AD大鼠海馬區(qū)長(zhǎng)期存活,可以促進(jìn)損傷區(qū)膽堿能神經(jīng)元的修復(fù),提高AD大鼠海馬膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶活性,改善AD大鼠的學(xué)習(xí)和
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