樺褐孔菌誘變菌株的同工酶及RAPD標(biāo)記研究.pdf

1、樺褐孔菌Inonotus obliquus(Fr.)Pilát是十分珍稀而又名貴的藥用真菌，在分類學(xué)上隸屬于擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina)、層菌綱(Hymenomycetes)、非褶菌目(Aphyllophorales)、刺革菌科(Polyporaceae)、褐臥孔菌屬(Poria hypobrunnea Petch)。主要分布在北半球北緯45°～50°地區(qū)。藥用部分為菌核，樺褐孔菌多糖是樺褐孔菌的主要藥效成分之一，具有抑

2、制細(xì)胞周期，降血糖等作用。近年來由于大量采摘及醫(yī)藥開發(fā)，野生資源己遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場對樺褐孔菌的需求，且野生樺褐孔菌中多糖含量僅為1.8％，如何培養(yǎng)出菌核產(chǎn)量高、多糖含量高的樺褐孔菌優(yōu)良菌株是當(dāng)務(wù)之急。
　　本試驗(yàn)以樺褐孔菌菌株JL01為試驗(yàn)材料，對JL01菌絲體片段進(jìn)行紫外線及60Co-γ輻照處理，以多糖含量為主要指標(biāo)，篩選樺褐孔菌優(yōu)良多糖高產(chǎn)菌株，并通過過氧化物同工酶及RAPD對篩選出的優(yōu)良多糖高產(chǎn)菌株及原菌株進(jìn)行分子鑒定。

3、r>　　試驗(yàn)結(jié)果表明：經(jīng)過紫外線照射3次、照射時間分別為20min與25min處理所得到的樺褐孔菌菌株為紫外線照射篩選出的2株樺褐孔菌優(yōu)良多糖高產(chǎn)菌株，將其分別命名為JLZ1、JLZ2；在60Co-γ輻照劑量為1000Gy、劑量率為48.31Gy/min時所得到的菌株為60Co-γ輻照所選育出的樺褐孔菌優(yōu)良多糖高產(chǎn)菌株，將其命名為JLC1；過氧化物同工酶試驗(yàn)結(jié)果表明：誘變菌株及原菌株在酶譜上有6條共有酶帶，特別是JL01所擁有的6條酶帶

4、在JLZ1、JLZ2、JLC1的酶譜上均可以找到，但JLZ1、JLZ2、JLC1之間酶帶數(shù)量、表達(dá)位置都完全相同，只是酶帶深淺存在差異，說明誘變菌株的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變；RAPD技術(shù)對誘變菌株及原菌株的擴(kuò)增結(jié)果表明：6個隨機(jī)引物共擴(kuò)增出74條帶，多態(tài)性條帶數(shù)為28條，說明RAPD技術(shù)可用于樺褐孔菌誘變菌株的鑒定。6個隨機(jī)引物均顯示出誘變菌株有異于原菌株的特征帶，這表明原菌株經(jīng)紫外線、60Co-γ輻照后遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化，與過氧化物同工酶