紅芪水提物對內毒素致ALI大鼠TNF-α、IL-10及NF-κBp65信號通路的影響.pdf

1、目的:通過紅芪水提物對ALI大鼠的作用,觀察紅芪水提物對ALI大鼠肺組織形態(tài)的影響,并進一步觀察紅芪水提物對ALI大鼠免疫功能及NF-κBp65信號通路的影響,探討其對ALI的治療作用及相關機制,為臨床應用紅芪治療ALI提供實驗依據(jù)。
　　方法:60只SPF級Wistar大鼠,體重180~220g,雌雄各半,用隨機數(shù)字表法分為正常對照組10只和造模組50只。造模組腹腔注射內毒素(LPS)5ml·kg-1誘導ALI模型。造膜成功后同

2、法隨機分為:模型組(M組)、紅芪水提物治療組(高、中、低劑量組)、陽性對照組(地塞米松組,DEX組),每組10只。造模4h后,紅芪水提物高、中、低劑量組大鼠分別以紅芪煎劑5.2g·kg-1、2.6g·kg-1、1.3g·kg-1灌胃,DEX組大鼠每只按0.01g·kg-1灌胃,NS組與M組大鼠以等容量NS灌胃,1次·d-1,連續(xù)3d。
　　末次給藥后24h脫頸處死所有大鼠,取肺稱重。取左肺稱重后,60℃干燥,48h,稱重;取右肺中

3、葉肺組織,4％甲醛固定,石蠟包埋,連續(xù)切4μm厚切片。其余肺組織-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。計算肺系?shù)(LI)、左肺的濕/干重比(W/D)及肺的含水率;利用光學顯微鏡觀察肺組織病理形態(tài)學改變;用免疫組化SP法檢測TNF-α和IL-10蛋白的表達;采用實時熒光定量PCR檢測肺組織中NF-κBp65(rela)mRNA、mapk14mRNA的表達。
　　結果:
　　(1)內毒素造膜后大鼠出現(xiàn)呼吸加深加快、毛發(fā)直立、弓背、口唇發(fā)紺、嗆咳

4、、精神萎靡、不思飲食等癥狀,表示造模成功。
　　(2)M組大鼠LI、W/D及肺含水率升高,NS組、紅芪水提物高、中、低劑量組及DEX組LI、W/D及肺含水率降低。
　　(3)光鏡下NS組肺泡結構清晰,無明顯炎性細胞浸潤和滲出;M組可見肺灶性出血,肺間質水腫,肺泡壁增厚,部分肺泡萎陷,血管及支氣管周圍大量炎細胞浸潤;DEX組肺組織結構較清晰,破壞較輕,肺充血水腫減輕,炎細胞浸潤現(xiàn)象明顯減輕或者消失;紅芪水提物高劑量組肺組織結構

5、清晰,肺泡間隔變窄,紅細胞及中性粒細胞滲出減輕,肺組織病理損傷明顯改善;紅芪水提物中、低劑量組大鼠肺泡腔內出血水腫程度及肺泡腔內炎癥細胞數(shù)量低于M組。
　　(4)M組肺組織TNF-α蛋白表達水平明顯升高;用藥各組TNF-α蛋白表達水平明顯下降;DEX組與紅芪水提物低劑量組療效相當;紅芪水提物高、中劑量組治療效果優(yōu)于低劑量組。
　　(5)M組肺組織IL-10蛋白表達水平下降;用藥各組肺組織IL-10蛋白表達水平升高;紅芪水提物

6、高、中劑量組與DEX組肺組織IL-10蛋白表達水平相當。
　　(6)M組NF-κBp65(rela)mRNA、mapk14mRNA的表達量明顯升高;用藥各組肺組織NF-κBp65(rela)mRNA、mapk14mRNA的表達量明顯下降。
　　結論:
　　1.紅芪水提物各治療組能夠改善ALI大鼠肺水腫、出血等組織形態(tài)學改變,明顯降低ALI大鼠LI、W/D及肺的含水率;
　　2.紅芪水提物高、中劑量組能夠明顯抑制A