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1、目的:本實(shí)驗(yàn)是通過檢測(cè)TNF-α、NF-kB在正常SD大鼠、SD大鼠肝纖維化模型中TNF-α介導(dǎo)NF-kB信號(hào)通路中的表達(dá)。同時(shí)用不同劑量紅景天對(duì)其干預(yù)并觀察其對(duì)細(xì)胞因子表達(dá)的影響并探討其作用機(jī)制。
方法:用隨機(jī)分組方法將70只健康的同齡雄性SD大鼠分為正常的對(duì)照組(C)、肝纖維化模型組(M)、高劑量紅景天治療組(G)、中劑量紅景天治療組(Z)及低劑量紅景天治療組(D)。除(C)組外其余4組均皮下注射橄欖油稀釋的10%CCL4
2、(5mL/kg),2次/周,共12W。復(fù)制肝纖維化模型,給藥劑量及方法均相同。正常對(duì)照組用生理鹽水代替10%CCL4。待12W末將(C)組以及(M)組大鼠處死迅速取出肝組織儲(chǔ)存?zhèn)溆?。?W開始將不同劑量紅景天組(G、Z、D)大鼠用紅景天煎劑灌胃。各組大鼠灌胃劑量分別是3125mg/kg.d、312.5mg/kg.d、31.25mg/kg.d,持續(xù)進(jìn)行12W。第20W末,分別處死G組、Z組、D組大鼠,取出其新鮮肝組織標(biāo)本迅速儲(chǔ)存以備用。H
3、E染色后觀察各組大鼠肝組織標(biāo)本的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化,并進(jìn)行對(duì)比分析。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)各組大鼠肝組織標(biāo)本中TNF-αmRNA、NF-κBmRNA的變化。
結(jié)果:1.肝組織切片HE染色顯示,與正常對(duì)照組(C)相比肝纖維化模型組(M)的肝組織原有形態(tài)結(jié)構(gòu)出現(xiàn)不同程度破壞,肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性甚至壞死、凋亡。纖維組織間隔不同程度增寬、增厚,小葉結(jié)構(gòu)破壞。大量炎細(xì)胞的侵潤(rùn),假小葉形成。而不同劑量紅景天治療組(G、Z、D組)的肝組織形
4、態(tài)結(jié)構(gòu)得到不同程度的改善,其中(Z)組改善較為明顯。
2.RT-PCR結(jié)果顯示:在肝纖維化模型組、高劑量治療組、中劑量治療組和低劑量治療組中,與正常組相比,TNF-α、NF-κB的基因表達(dá)在肝纖維化模型組上調(diào)明顯(P<0.01);與模型組相比,紅景天各治療組(高、中、低劑量組)中的基因表達(dá)均有不同程度的降低,以中劑量治療組最顯著(P<0.01)。
結(jié)論:1.TNF-α和NF-κB在肝纖維化模型中有顯著改變,可能與肝纖
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