荔枝核總黃酮對肝纖維化大鼠NF-ΚB及MMP-2表達的影響.pdf

1、目的:觀察荔枝核總黃酮(Total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)拮抗肝纖維化效應(yīng),及其對核轉(zhuǎn)錄因子-ΚB(Nuclear transcription factors-ΚB,NF-ΚB)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(Matrix metalloproteinases-2,MMP-2)在實驗性大鼠肝纖維化肝組織中表達影響,探討TFL抗肝纖維化的作用機制。
　　方法:將50只雄性SD大鼠隨機分為

2、正常對照組(Normal group)、模型組(Fibrosis model group)、TFL高劑量組(TFL high dose group)、TFL低劑量組(TFL low dose group)和秋水仙堿陽性對照組(Colchicine group,Col group),每組10只。模型組、TFL高劑量組、TFL低劑量組及秋水仙堿陽性對照組大鼠用0.5％的DMN溶液(生理鹽水稀釋)按2ml/kg劑量于每周前3天連續(xù)腹腔注射,共

3、4周,制作大鼠肝纖維化模型;造模同時TFL高劑量組以TFL200mg/(kg·d)灌胃給藥,TFL低劑量組以TFL100mg/(kg·d)灌胃給藥,秋水仙堿組以Col0.1mg/(kg·d)灌胃給藥,正常對照組及模型組給予等體積生理鹽水灌胃,每日1次,共6周;6周后大鼠處死大鼠,大鼠處死前稱重,抽取下腔靜脈血,摘取肝脾并稱重,計算大鼠肝脾指數(shù);全自動生化儀檢測血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、

4、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)水平,酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)檢測血清中透明質(zhì)酸(Hyaluronic acid,HA)、層粘連蛋白(Laminin,LN)、基質(zhì)金屬酶-2(Matrix metalloproteinases-2,MMP-2)含量;取肝臟同一部位行HE、Masson染色觀察大鼠肝纖維化程度,對其進行肝

5、纖維化程度評分;采用SP免疫組化方法檢測各組肝組織NF-ΚB、MMP-2的表達;對血清MMP-2水平與HA、LN、肝纖維化程度進行相關(guān)性分析,對肝組織NF-ΚB、MMP-2蛋白的表達與肝纖維化程度進行相關(guān)性分析,對肝組織NF-ΚB與MMP-2蛋白表達進行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果:TFL高劑量組、TFL低劑量組肝脾指數(shù)較模型組明顯降低(P<0.05),TFL高劑量組、TFL低劑量組血清ALT、AST、HA、LN、MMP-2水平較模型組

6、明顯降低(P<0.05),TFL高劑量組、TFL低劑量組肝組織纖維化程度較模型組明顯減輕(P<0.05),TFL高劑量組、TFL低劑量組肝組織NF-ΚB、MMP-2蛋白的表達較模型組明顯減低(P<0.05)。血清MMP-2水平與HA、LN、纖維化程度呈正相關(guān)(r=0.844,0.847,0.850,p均<0.05),肝組織NF-ΚB、MMP-2蛋白的表達與肝纖維化程度呈正相關(guān)(r=0.586,0.673,p<0.05),肝組織中NF-Κ