復(fù)方半枝蓮對(duì)肝纖維化大鼠MMP-2、TIMP-2及血清學(xué)指標(biāo)的影響.pdf

1、目的：本課題通過(guò)觀察不同濃度的復(fù)方半枝蓮對(duì)肝纖維化大鼠模型肝臟組織學(xué)改變和血清指標(biāo)的影響，探討和評(píng)價(jià)復(fù)方半枝蓮抗肝纖維化的作用機(jī)制，為復(fù)方半枝蓮在臨床上的進(jìn)一步推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　方法：將60只SPF級(jí)SD雄性大鼠隨機(jī)分成6組，分別為正常組（第1組）、模型組（第2組）、復(fù)方半枝蓮低劑量組（第3組）、復(fù)方半枝蓮中劑量組（第4組）、復(fù)方半枝蓮高劑量組（第5組）、秋水仙堿組（第6組），每組10只。第1組采用普通飼料喂養(yǎng)，飲自來(lái)水

2、，每天早上空腹用生理鹽水灌胃一次，共4w；第2、3、4、5、6組采用皮下注射40% CCl4配合高脂飼料和酒精干預(yù)方法建立大鼠肝纖維模型，自造模之日起各組每天早上分別空腹灌胃生理鹽水、復(fù)方半枝蓮低劑量溶液、復(fù)方半枝蓮中劑量溶液、復(fù)方半枝蓮高劑量溶液、秋水仙堿混懸液，共灌胃給藥4w。4w后取血、取肝臟。全血靜置離心后取血清，以全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定大鼠肝功能，放射性免疫方法（RIA）檢測(cè)PCⅢ、ColⅣ、HA、LN的含量；肝臟用生理鹽水沖洗

3、后拍照，并留取肝臟左葉做石蠟切片，采用HE、Masson染色，光鏡下觀察肝組織病理學(xué)變化，參照組織學(xué)活動(dòng)指數(shù)（HAI）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)纖維化進(jìn)行分級(jí)測(cè)定；免疫組織化學(xué)（IHC）方法檢測(cè)肝組織MMP-2、TIMP-2的表達(dá)，以半定量方法評(píng)定。
　　結(jié)果：（1）血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果：模型組大鼠血清ALT、AST、PCⅢ、ColⅣ、HA、LN水平均升高，各給藥組大鼠血清AST、ALT、PCⅢ、ColⅣ、HA、LN水平不同程度降低。（2）肝組織病理學(xué)改變

4、：模型組大鼠肝細(xì)胞明顯變性、壞死，增生的肝細(xì)胞被大量膠原纖維包繞形成假小葉，各給藥組大鼠肝細(xì)胞的變性、壞死均有不同程度改善，膠原纖維數(shù)量明顯少于模型組。（3）免疫組化結(jié)果：模型組MMP-2/TIMP-2明顯表達(dá)，正常組和各用藥組均低表達(dá)。
　　結(jié)論：復(fù)方半枝蓮能夠明顯改善肝纖維化大鼠模型的肝功能，降低其血清肝纖維化指標(biāo)PCⅢ、ColⅣ、HA、LN水平，顯著改善肝組織病理學(xué)損害，其抗肝纖維化的作用機(jī)制可能與復(fù)方半枝蓮能降低MMP-2