荔枝核總黃酮對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠肝纖維化PPARγ-cSki信號(hào)的影響.pdf

1、目的:觀察荔枝核總黃酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn，TEL)對(duì)二甲基亞硝胺(DMN)誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠的防治效果，并從PPARγ、c-Ski信號(hào)分子角度探討TFL抗纖維化的作用機(jī)制。
　　方法:將90只雄性SD大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、TFL高劑量組、TFL中劑量組、TFL低劑量組和秋水仙堿陽(yáng)性對(duì)照組，每組15只。模型組、TFL高劑量組、TFL中劑量組、TFL低劑量組及秋

2、水仙堿陽(yáng)性對(duì)照組大鼠用0.5％的DMN溶液（生理鹽水稀釋?zhuān)┌?ml/kg劑量于每周前3天連續(xù)腹腔注射，共4周，制作大鼠肝纖維化模型;造模同時(shí)TFL高劑量組以TFL200mg.kg-1.d-1灌胃給藥，TFL中劑量組以TFL100mg.kg-1.d-1灌胃給藥，TFL低劑量組以TFL50 mg.kg-1.d-1灌胃給藥，秋水仙堿組以秋水仙堿0.1 mg.kg-1.d-1灌胃給藥，空白對(duì)照組及模型組給予等體積生理鹽水灌胃，每日1次，共6周;

3、6周末處死大鼠，腹主動(dòng)脈真空負(fù)壓采血檢測(cè)天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)血清水平;留取肝臟同一部位行HE，Masson染色觀察大鼠病理改變及肝纖維化程度并行肝纖維化半定量評(píng)分;采用免疫組化和Westem Blot檢測(cè)各組肝組織α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)的表達(dá);采用免疫組化方法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time Quantitative Polymerase chai

4、nReaction，qPCR)檢測(cè)過(guò)氧化物酶體增殖物活化受體γ(peroxisomeproliferators-activated receptor gamma, PPARγ)、 c-Ski(cellularsloan-kettering institute，c-Ski)的mRNA和蛋白的表達(dá)水平，對(duì)肝組織PPARγ與c-Ski進(jìn)行相關(guān)性分析，并分別對(duì)PPARγ、c-Ski、α-SMA、肝纖維化程度的免疫組化結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。

5、　　結(jié)果:與空白對(duì)照組比較，模型組大鼠血清AST，ALT和肝纖維半定量評(píng)分均顯著升高(P＜0.01）;肝組織α-SMA蛋白表達(dá)明顯升高(P＜0.01)，PPARγ、c-Ski mRNA和蛋白表達(dá)明顯降低(P＜0.01);與模型組比較，荔枝核總黃酮各組血清AST，ALT和肝纖維半定量評(píng)分均明顯降低(P＜0.01)，肝組織α-SMA蛋白表達(dá)明顯降低(P＜0.01)，肝組織PPARγ、c-Ski mRNA和蛋白表達(dá)的表達(dá)明顯升高(P＜0.01

6、)，且具有一定量效關(guān)系。相關(guān)分析顯示:肝組織中PPARγ與c-Ski的基因和蛋白表達(dá)均呈正相關(guān)（r=0.885，0.892，P＜0.01）;肝組織α-SMA的表達(dá)與肝纖維化程度呈正相關(guān)（r=0.808，P＜0.01）;肝組織中PPARγ、c-Ski與α-SMA的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.614，-0.647，P＜0.01）;肝組織PPARγ、c-Ski的表達(dá)與肝纖維化程度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.406，-0.484，P＜0.05)。