COX-2shRNA對實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化的影響.pdf

1、目的：研究COX-2shRNA對CCL4復(fù)合因素誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化的防治作用及其作用機(jī)制。
　　方法：⑴實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化模型的建立：50只清潔級SD大鼠正常喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為5組：正常組、模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組、尼美舒利組，每組10只。除正常組外，其它各組均以 CCl4溶液(40％CCl4花生油，2ml/kg?次?5d)灌胃，同時予以高脂飲食(普通飼料基礎(chǔ)上加2%膽固醇、10%豬油)喂養(yǎng)。并于造模1周后，

2、COX-2shRNA治療組予以尾靜脈注射100ulCOX-2shRNA，空載體組予以尾靜脈注射100ul空載體，其余3組均予等量生理鹽水尾靜脈注射，1次/d；同時尼美舒利組予以尼美舒利6mg/kg灌胃，其余4組均予等量0.5%羧甲基纖維素鈉溶液灌胃，1次/d；正常組予以普通飼料喂養(yǎng)。⑵各組大鼠檢測指標(biāo)的觀察：觀察各組大鼠一般情況,于干預(yù)12周后稱量體重，處死大鼠后取血及肝組織，觀察肝臟大體外觀，并計算肝指數(shù)(肝濕重/體重x100%)，并

3、檢測大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平；各組肝組織行蘇丹IV染色、 HE染色和Masson膠原染色觀察大鼠肝臟組織病理學(xué)的改變；采用RT-PCR法檢測大鼠肝臟COX-2、α-SMA、CCL2、P53、CXCL10mRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：①COX-2shRNA對大鼠體重、肝指數(shù)的影響：造模結(jié)束時各組大鼠的體重均有所增加。與正常組比較，模型組和空載體組大鼠體重增長緩慢，但

4、模型組、空載體組和尼美舒利組肝指數(shù)顯著升高,均有顯著性差異(P<0.01)；COX-2shRNA治療組和尼美舒利組大鼠體重增長較模型組和空載體組快，肝指數(shù)低于模型組和空載體組，尤以COX-2shRNA治療組效果更佳(P<0.01,0.05)；空載體組與模型組之間體重和肝指數(shù)無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。②COX-2shRNA對大鼠血清學(xué)指標(biāo)的影響：與正常組比較，模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組及尼美舒利組大鼠血清中 ALT、

5、AST、TC、TG水平均明顯升高(P<0.01)；除尼美舒利組和空載體組的TG水平無差異性(P>0.05)外，尼美舒利組其余指標(biāo)和COX-2shRNA治療組的各項(xiàng)指標(biāo)均低于模型組和空載體，其中以COX-2shRNA治療組下降更明顯(P<0.01，P<0.05)；模型組和空載體組各血清學(xué)指標(biāo)無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。③COX-2shRNA對大鼠病理學(xué)的影響：據(jù)蘇丹IV染色、HE染色及Masson膠原染色所示，模型組、COX-2shRN

6、A治療組、空載體組、尼美舒利組大鼠病理學(xué)評分及膠原面積分析均明顯升高于正常組(P<0.01)；COX-2shRNA治療組及尼美舒利組病理學(xué)評分及膠原面積分析低于模型組和空載體組，且以 COX-2shRNA治療組效果更明顯(P<0.01,P<0.05)；空載體組與模型組病理學(xué)評分及膠原面積分析無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。④COX-2shRNA對大鼠各基因mRNA表達(dá)的影響：模型組、COX-2shRNA治療組、空載體組和尼美舒利組大鼠肝臟

7、組織中COX-2、α-SMA、CCL2、P53、CXCL10mRNA表達(dá)水平較正常組均明顯升高(P<0.01)；COX-2shRNA治療組和尼美舒利組各個基因mRNA表達(dá)水平較模型組和空載體組均下調(diào)，以 COX-2shRNA治療組下調(diào)更明顯(P<0.01)；模型組與空載體組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：⑴COX-2shRNA可降低肝纖維化大鼠血脂，改善其肝功能及肝臟病理學(xué)變化，具有肝纖維化保護(hù)作用。⑵COX-2sh