實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化自發(fā)逆轉(zhuǎn)研究.pdf

1、目的:在肝纖維化過程中,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)和組織金屬蛋白酶抑制因子-1 (TIMP-1)對(duì)肝纖維化的形成均發(fā)揮重要的促進(jìn)作用,TGF-β1可促進(jìn)Ⅰ、Ⅲ型膠原合成,使細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)沉積增加,TIMP-1則通過特異性結(jié)合組織金屬蛋白酶(MMPs),抑制MMPs的活性,從而減少ECM的降解.該實(shí)驗(yàn)旨在研究CCI<,4>誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠在去除誘導(dǎo)因素后,肝纖維化自發(fā)逆轉(zhuǎn)過程中肝臟的病理學(xué)改變,以及TGF-β1和TIMP-

2、1表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化及組織分布,以探討其在肝纖維化自發(fā)逆轉(zhuǎn)過程中所發(fā)揮的作用.材料與方法:30只雄性SD大鼠被隨機(jī)分為5組,每組6只.其中1組作為正常對(duì)照組(N組),另外4組建立大鼠肝纖維化模型,給予40﹪CCl<,4>(橄欖油配制)皮下注射,劑量為每次0.3ml/100g體重,每周3次,共計(jì)12周.經(jīng)病理組織學(xué)證實(shí)已形成肝纖維化后停止注射,隨機(jī)處死6只大鼠,定為肝纖維化組(F組),以后分別于停止注射后第7、20、30天各隨機(jī)處死6只大鼠,

3、分別定為不同時(shí)間肝纖維化逆轉(zhuǎn)組(T1、T2、T3組),N組與T3組同時(shí)處死.各組大鼠肝臟組織標(biāo)本部分經(jīng)3﹪戊二醛固定后石蠟包埋切片,HE染色后觀察各組肝纖維化程度,根據(jù)1997年世界肝臟病學(xué)會(huì)通過的肝纖維化分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí),免疫組化(SABC方法)和圖像分析測(cè)定肝組織中TIMP-1和TGF-β1的表達(dá)與定位.部分肝組織抽提RNA,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)檢測(cè)TIMP-1和TGF-β1的mRNA的動(dòng)態(tài)表達(dá).結(jié)論:在肝纖維化自