整合素ανβ受體靶向超聲增強(qiáng)造影評(píng)估大鼠肝纖維化實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、慢性肝病是我國沉重的疾病負(fù)擔(dān)之一，肝硬化常是肝損傷進(jìn)展的最終結(jié)局，造成較高的病殘率和病死率。不能對(duì)肝纖維化進(jìn)行早期發(fā)現(xiàn)和實(shí)時(shí)干預(yù)評(píng)估一直是制約基礎(chǔ)研究走向臨床的“瓶頸”。現(xiàn)在已有大量的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明肝纖維化伴隨著血管新生，與免疫、炎癥等病理生理過程關(guān)系密切。整合素αvβ3在肝星狀細(xì)胞活化和血管新生中起著重要作用。本課題的研究目的是通過高分辨率小動(dòng)物超聲系統(tǒng)用以靶向環(huán)肽標(biāo)記的超聲增強(qiáng)造影劑，觀察正常大鼠和纖維化大鼠肝臟超聲增強(qiáng)前后的聲像變化

2、，分析不同時(shí)期纖維化大鼠肝臟聲像差異和肝組織病理分期的相關(guān)性；建立整合素α vβ3受體的靶向超聲增強(qiáng)影像與肝纖維化程度的關(guān)系；為肝纖維化早期診斷和治療評(píng)價(jià)探索可靠實(shí)用的無創(chuàng)性方法。
　　研究內(nèi)容包括如下幾個(gè)方面：第一部分是體外實(shí)驗(yàn)，包括大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC)的分離、培養(yǎng)、鑒定和體外活化，對(duì)整合素α vβ3在HSC的表達(dá)情況進(jìn)行定性、定位和定量分析；通過固相合成法合成c(RGDyK)環(huán)肽和c(RGAyk)假肽，ESI-MS測(cè)定分子

3、量，HPLC進(jìn)行純度分析，并研究其與活化HSC結(jié)合的生物化學(xué)特征。第二部分是硫代乙酰胺(TAA)誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型的建立，以及整合素αvβ3的表達(dá)情況和血管新生的研究。第三部分是Biotin-PEG-c(RGDyK)/c(RGAyK)的合成，與微泡的結(jié)合及高分辨率小動(dòng)物超聲系統(tǒng)對(duì)不同纖維化時(shí)期的大鼠肝臟進(jìn)行超聲造影，取大鼠肝組織進(jìn)行病理檢查。
　　研究結(jié)果：體外活化的大鼠HSC中整合素α vβ3表達(dá)顯著增高，固相合成的整合素α