咖啡因治療大鼠肝纖維化的實驗性研究.pdf

1、目的:利用咖啡因干預(yù)四氯化碳(Carbon tetrachloride，CCl4)誘導(dǎo)SD大鼠所形成的肝纖維化，并觀察大鼠相關(guān)指標(biāo)的變化，并探討咖啡因可能的治療機制。
　　方法:把SD大鼠100只隨機分為4組，每組25只，并予橄欖油3ml/(kg大鼠體重)皮下注射空白對照組(n=25)，每周2次，共注射8周;將含50％CCl4的橄欖油混合溶液以3ml/（kg大鼠體重）皮下注射于模型組(n=25)及咖啡因治療組(n=25)予以，每周

2、2次，共注射8周;咖啡因?qū)φ战M(n=25)不予以肝纖維化造模處理。同時，咖啡因治療組和咖啡因?qū)φ战M均于第一周開始予以咖啡因灌胃，50mg/(kg大鼠體重)，1次/日;以羧甲基纖維素鈉(Sodium carboxymethyl cellulose，CMC-Na)用于空白對照組和模型組的大鼠進(jìn)行灌胃治療，方法同咖啡因，共治療8周。在第九周時，大鼠被麻醉后將其處死并稱量，分別取肝臟相同部位組織分別進(jìn)行HE染色和Masson染色并進(jìn)行評分，取其

3、肝組織進(jìn)行HE、Masson染色，進(jìn)行肝臟炎癥活動度半定量評分和肝組織纖維化半定量評分，采用免疫組織化學(xué)染色后檢測肝組織α-平滑肌肌動蛋白(Alpha-Smooth muscle actin，α-SMA)的表達(dá)量，并采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real time quantitativePolymerase Chain Reaction，Real time qPCR)檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β1(Transforming growth fa

4、ctor-beta1，TGF-β1)、結(jié)締組織生長因子(Connective tissue growth factor，CTGF)和α-SMA的表達(dá)量。
　　結(jié)果:與空白對照組相比較，大鼠（模型組）的體重變化、病理評分、TGF-β1、CTGF和α-SMA的表達(dá)有明顯的增高(P＜0.01);與模型組相比較，大鼠（咖啡因治療組）體重變化、肝纖維化病理評分、TGF-β1、CTGF的表達(dá)有明顯的下降(p＜0.01)，而α-SMA的表達(dá)與T

5、GF-β1、CTGF的表達(dá)相比較，前者的降低程度相對不明顯(p＜0.05)，但是仍然具有統(tǒng)計學(xué)意義;將咖啡因?qū)φ战M與空白對照組進(jìn)行比對時，上述檢測數(shù)據(jù)均無明顯統(tǒng)計學(xué)差異，即p＞0.05。
　　結(jié)論:(1)咖啡因能在一定程度上抑制由CCl4誘導(dǎo)的SD大鼠所形成的實驗性肝纖維化;(2)在短期內(nèi)（8周）持續(xù)攝入咖啡因后，健康大鼠的肝臟未見顯著性改變(P＞0.05);(3)咖啡因的抗肝纖維化機制可能為:抑制肝臟炎癥反應(yīng)，抑制HSCs及MF