激動(dòng)素抗實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：激動(dòng)素本源于植物，其生物活性主要是促進(jìn)細(xì)胞分裂。目前廣泛應(yīng)用于植物細(xì)胞的組織培養(yǎng)，近年來(lái)有人認(rèn)為其對(duì)肝纖維化形成有一定抑制作用，但是關(guān)于激動(dòng)素抗肝纖維化作用的相關(guān)研究還很少。為了探討該藥物的作用機(jī)制我們進(jìn)行了本實(shí)驗(yàn)研究，旨在：(1)研究Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ膠原在四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)肝纖維化模型大鼠肝組織中的變化以及激動(dòng)素對(duì)其的影響；(2)觀察激動(dòng)素對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化表達(dá)TGF-β1的影響；(3)觀察激動(dòng)素對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)

2、性大鼠肝纖維化表達(dá)凋亡基因Bcl-2、Bax的影響。 方法：(1)用CCl4誘導(dǎo)形成大鼠肝纖維化模型，使用0.1％激動(dòng)素溶液0.5ml·100g·d，背部皮下注射，治療12周，設(shè)正常對(duì)照組和模型組。血清ALT用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，血清透明質(zhì)酸(HA)、層黏連蛋白(LN)、三型前膠原(PCⅢ)和四型膠原(CⅣ)含量用RIA方法檢測(cè)。肝組織學(xué)檢查蘇木精-伊紅染色觀察肝組織炎癥和纖維化程度。應(yīng)用苦味酸天狼猩紅偏振光法和圖像分析技術(shù)對(duì)

3、三組中的含量及分布特點(diǎn)進(jìn)行觀察。(2)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組大鼠肝組織Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原和TGF-β1的表達(dá)情況。(3)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組大鼠肝組織Bcl-2和Bax基因的表達(dá)情況。 結(jié)果：結(jié)果顯示，與四氯化碳模型組及正常對(duì)照組比較，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中激動(dòng)素：(1)血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明，激動(dòng)素組ALT水平與模型組ALT水平分別為(57.40±17.49u)和(84.70±31.85u)，激動(dòng)素組與模型組比較有明顯改善(P＜0.05

4、)，血清肝纖維化指標(biāo)中激動(dòng)素組LN和CⅣ含量分別為(29.25±6.67ng/ml)和(14.84±5.84ng/ml)較模型組(37.18±10.06ng/ml，35.69±30.84ng/ml)明顯降低(P＜0.05)，激動(dòng)素組HA和PCⅢ含量分別為(136.25±76.83ng/ml)和(11.43±3.67ng/ml)較模型組(168.55±56.19ng/ml，14.64±8.00ng/ml)有不同程度降低，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。組織

5、學(xué)檢查結(jié)果表明，模型組肝臟炎癥和纖維化程度明顯高于激動(dòng)素治療組。(2)偏振光顯微鏡下可見(jiàn)Ⅰ型膠原纖維為黃或紅色，呈致密的條束狀，顯示很強(qiáng)的雙折光性，Ⅲ型膠原纖維為綠色的細(xì)纖維，呈疏網(wǎng)狀，顯示弱的雙折光。經(jīng)圖象分析，其中激動(dòng)素組Ⅰ型膠原與Ⅲ型膠原分別為(2.107±0.833)％和(1.114±0.413)％較模型組(4.473±2.311)％和(1.964±0.854)％顯著降低(P＜0.01)，上述兩組較正常對(duì)照組(0.763±0.3

6、95)％和(0.418±0.306)％也顯著降低(P＜0.01)。(3)圖象分析顯示肝組織Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原和TGF-β1表達(dá)減弱(P＜0.01或P＜0.05)；(4)肝組織Bcl-2和Bax均減弱(P＜0.05)，但Bax/Bcl-2無(wú)明顯變化(P＞0.05)，纖維間隔中Bcl-2減弱(P＜0.01)，Bax無(wú)明顯變化(P＞0.05)，Bax/Bcl-2(P＜0.01)。(5)肝纖維化程度減輕。 結(jié)論：(1)激動(dòng)素可以抑制肝組織