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1、研究背景和目的肝纖維化是各種慢性肝病發(fā)展為肝硬化的前期病變,是一個(gè)可逆轉(zhuǎn)的病理過(guò)程.肝星狀細(xì)胞(Hepatic stellate cell,HSC)凋亡是肝纖維化發(fā)生逆轉(zhuǎn)的主要機(jī)制之一.但目前對(duì)HSC凋亡的機(jī)制尚未完全闡明.低親和力神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體(low attinity nerve growth factor receptor,p75)是腫瘤壞死因子受體超家族的成員,參與神經(jīng)細(xì)胞、視網(wǎng)膜細(xì)胞等凋亡.已有研究發(fā)現(xiàn)人和大鼠的HSC特異性
2、地表達(dá)p75.在HSC的眾多凋亡受體中,p75可能選擇性地誘導(dǎo)HSC凋亡.該實(shí)驗(yàn)旨在研究CCl<,4>誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠在去除誘導(dǎo)因素后,動(dòng)態(tài)觀察在肝纖維化自發(fā)逆轉(zhuǎn)過(guò)程中HSC凋亡和p75表達(dá)的變化趨勢(shì),以探討兩者的關(guān)系,并為特異性促進(jìn)HSC凋亡逆轉(zhuǎn)肝纖維化奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).方法第一部分:雄性SD大鼠40只分為正常對(duì)照組6只,模型組34只.模型組予以40%CCl<,4>皮下注射,每周3次.在病理組織學(xué)證實(shí)形成肝纖維化后停止注射CCl<,4>
3、并隨機(jī)處死6只作為纖維化組(F組),同時(shí)處死正常組大鼠(N組).于停止注射CCl4后7天、20天、30天分別處死6只(T1、T2、T3組).取右葉肝組織進(jìn)行固定、石蠟包埋、HE染色.根據(jù)1997年世界肝臟病學(xué)會(huì)通過(guò)的肝纖維化分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí).第二部分:采用TUNEL法結(jié)合免疫組化染色觀察HSC凋亡的變化趨勢(shì).同時(shí)應(yīng)用透射電鏡觀察HSC凋亡的形態(tài)變化.利用免疫組化觀察p75表達(dá)的變化趨勢(shì)與定位.結(jié)論在肝纖維化逆轉(zhuǎn)過(guò)程中,活化的HSC細(xì)胞數(shù)
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