豬骨蛋白對骨質疏松模型大鼠骨密度和相關的生化分子的影響.pdf

1、目的:通過測定骨密度及相關各項指標探討豬骨蛋白對骨質疏松模型大鼠的影響。
　　方法:本實驗采用大鼠糖皮質激素骨質疏松模型及骨損傷模型,對豬骨蛋白的抗骨質疏松作用進行實驗研究。(1)將3月齡Wistar大鼠60只隨機分為6組:空白對照組、模型組、陽性藥組、骨蛋白高劑量組、中劑量組、低劑量組。空白對照組,按10ml/kg每天灌胃給予蒸餾水;模型組,按2.5ml/kg每周兩次肌肉注射地塞米松;骨質疏松模型豬骨蛋白高劑量組,按200mg/

2、kg每天灌胃給予豬骨蛋白:中劑量組,100mg/kg每天灌胃給予豬骨蛋白,低劑量組,按50mg/kg每天灌胃給予豬骨蛋白;陽性藥組,按300mg/kg每天灌胃給予接骨七厘片。除空白組外,其余各組肌肉注射地塞米松2.5mg/kg,每周兩次,連續(xù)注射6周造成骨質疏松模型。連續(xù)給藥12周后,取血、尿用于測定血鈣(Ca)、磷(P)和堿性磷酸酶(ALP);放射性免疫法測定血清骨鈣素(BGP)的含量以及尿鈣(Ca)、尿磷(P)、尿肌酐(Cr)和尿羥

3、脯氨酸(HOP)的含量。實驗結束后取大鼠脛骨檢查骨密度。處死時留取脛骨制作脫鈣骨切片做骨組織形態(tài)計量學分析。(2)取Wistar大鼠60只,制成脛骨骨損傷模型,隨機分為6組:模型組,陽性組,高劑量組,中劑量組,低劑量組,每組均為20只大鼠?？瞻捉M每日灌胃給予10ml/kg蒸餾水,陽性組每日給予300mg/kg接骨七厘片,高劑量組每日給予200mg/kg豬骨蛋白,中劑量組每日給予100mg/kg豬骨蛋白,低劑量組每日給予50mg/kg豬骨

4、蛋白。連續(xù)給藥20d后,取一半大鼠脛骨進行放射學觀察和骨痂組織學觀察,另一半大鼠繼續(xù)給藥,40d后,取剩余大鼠脛骨進行放射學觀察和骨痂組織學觀察。本實驗數據利用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計,P<0.05表示統(tǒng)計學上差異有顯著性。
　　結果:(1)骨蛋白高、中和低劑量組血磷含量分別為:2.28±0.35 mmol/L,2.34±0.32 mmol/L和2.29±0.30 mmol/L,均比骨質疏松模型組明顯降低(2.61±0.

5、23mmol/L)(P<0.05);堿性磷酸酶(ALP)含量分別為:94.50±19.79 U/L,102.1±23.96 U/L和110.1±23.53 U/L,均明顯比骨質疏松模型組降低(137.9±23.99U/L)(P<0.05);血清骨鈣素含量分別為:1.69±0.27 ng/L,1.80±0.20 ng/L和1.73±0.17 ng/L,均比骨質疏松模型組明顯降低(1.97±0.24 ng/L)(P<0.05);骨蛋白高、中

6、和低劑量組尿鈣(肌酐)和尿羥脯氨酸(肌酐)含量分別為:0.16±0.05 mmol/μmol/0.20±0.05μg/μmol,0.18±0.04 mmol/μmol/0.24±0.05μg/μmol和0.22±0.04 mmol/μmol/0.25±0.05μg/μmol,分別明顯低于模型組(0.27±0.08mmol/μmol/0.29±0.07μg/μmol)(P<0.05)。各組血鈣,尿磷/肌酐(P/Cr)均無顯著性改變。骨質疏

7、松模型組大鼠脛骨骨密度值比模型組低(P<0.01);陽性對照組和骨蛋白三個劑量組骨密度值(0.150±0.015 g/cm~2,0.152±0.015 g/cm2和0.148±0.013 g/cm~2)均比模型組(0.136±0.012 g/cm2)高(P<0.05)。高劑量和中劑量的骨小梁厚度分別為:48.73±12.2μml,48.17±10.28μml,均比模型組(36.23±12.27μml)的大(P<0.05)。豬骨蛋白三個劑

8、量組的骨小梁面積百分比(30±8.98％,38.41±11.27%和40.59±9.88%)均均比模型組(29.57±7.19%)大(P<0.05)。組織形態(tài)學觀察表明,豬骨蛋白三個劑量給藥組大鼠的骨小梁結構均明顯改善。(2)給藥20d后,放射學結果顯示:豬骨蛋白三個劑量組骨折線愈合比模型組快;組織學結果顯示:豬骨蛋白組的成骨細胞比模型組活躍且骨小梁生長的比較好。給藥40d后,放射學結果顯示:豬骨蛋白高、中劑量組的骨折線基本愈合,模型組