中醫(yī)針刺對(duì)腦缺血后內(nèi)源性內(nèi)皮祖細(xì)胞調(diào)節(jié)作用的初探.pdf

1、中醫(yī)針刺用于治療腦缺血疾病在臨床上已取得良好的療效，對(duì)其治療途徑和機(jī)制的探討也積累了一定的成果。針刺可以從多種途徑治療和改善腦梗塞導(dǎo)致的缺血性腦血管病的病癥，其中改善腦血流循環(huán)，增加腦血流量，改善半暗帶供血，促進(jìn)血管新生是治療和預(yù)后的關(guān)鍵途徑之一。
　　 內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells，EPCs)與血管新生有著密切的聯(lián)系。有效地將骨髓中的EPCs動(dòng)員到外周血，并參與病損區(qū)的血管新生是改善腦血

2、流循環(huán)的重要途徑。據(jù)此，本研究以EPCs為切入點(diǎn)，就針刺在血管新生方面治療腦缺血損傷的機(jī)制進(jìn)行初步探索，以期為針刺促進(jìn)腦缺血后的血管新生的論斷提供新的理論依據(jù)。本文的主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　　 ①EPCs的體外培養(yǎng)及鑒定：分離大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞，經(jīng)VEGF，bFGF誘導(dǎo)培養(yǎng)呈現(xiàn)“集落”等典型結(jié)構(gòu)，通過CD31和VE-cadherin進(jìn)行表型鑒定以及Ac-LDL和UEA-1進(jìn)行功能鑒定，證明骨髓來源的單個(gè)核細(xì)胞可在VEGF，b

3、FGF等生長(zhǎng)因子的誘導(dǎo)下成為功能性的EPCs；
　　 ②腦缺血模型的復(fù)制及針刺治療：將雄性SD大鼠分為正常組、假手術(shù)組、模型組、針刺組，其中將模型組和針刺組分別制作大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型，針刺組取“曲池”和“足三里”兩穴，在造模前和造模后進(jìn)行針刺。研究結(jié)果顯示，MCAO模型能穩(wěn)定地形成腦缺血損傷，而在針刺治療后，腦缺血大鼠的神經(jīng)功能恢復(fù)較未經(jīng)過針刺治療的模型組快。
　　 ③不同分組外周血EPCs數(shù)量及血清中相關(guān)因

4、子的檢測(cè)：將各組大鼠分24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)抽取外周血，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血中EPCs數(shù)量，并用紫外分光法檢測(cè)血清中NOS活性，ELISA法檢測(cè)血清中VEGF，MMP-9和bFGF含量。研究結(jié)果表明，腦缺血損傷可以增加外周血中EPCs數(shù)量，而針刺刺激對(duì)這一改變有一定的調(diào)節(jié)作用。在造模后48h，針刺刺激對(duì)EPCs的動(dòng)員作用明顯。而在造模后24h和72h，針刺組外周血中EPCs數(shù)量低于模型組；與模型組相比，針刺可在一定程度上降

5、低iNOS活性；針刺可造成VEGF的高表達(dá)，各時(shí)間點(diǎn)均高于對(duì)照組；針刺組MMP-9的含量隨時(shí)間的變化也有區(qū)別于模型組；同時(shí)造模后72h，在針刺組和模型組血清中還檢測(cè)到了bFGF的表達(dá)，且針刺組含量較模型組高。
　　 骨髓中存在有一定量的具有分化能力的EPCs，針刺可以調(diào)節(jié)腦缺血后外周血中EPCs的數(shù)量，并且起到動(dòng)員EPCs的作用。初步實(shí)驗(yàn)表明，針刺的上述作用有可能是通過降低iNOS的活性，延緩炎癥反應(yīng)，上調(diào)VEGF，bFGF的表