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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分運(yùn)用套管法建立胸主動(dòng)脈腹腔移植模型
目的:尋找一種可模擬心臟移植物血管病發(fā)病機(jī)制,同時(shí)簡(jiǎn)單易學(xué)、可復(fù)制性強(qiáng)、存活率高的動(dòng)物模型。
方法:利用自制套管,將供體胸主動(dòng)脈套入套管并將其移植至受體的腹主動(dòng)脈中。將30只受體SD系大鼠隨機(jī)分成2組,分別接受供體Wistar系和SD系大鼠的胸主動(dòng)脈移植,構(gòu)建同基因移植組(SD To SD)(A組)和異基因移植組(Wistar To SD)(B組)大鼠各15只。術(shù)前、術(shù)后均
2、禁食12小時(shí),可自由飲水。以麻醉清醒后四肢能自由活動(dòng),可自由飲水為手術(shù)成功標(biāo)志。于7、28及56天3個(gè)時(shí)間點(diǎn),取各移植動(dòng)脈標(biāo)本(n=5)行病理檢查觀察其病理變化,并用計(jì)算機(jī)圖像系統(tǒng)分析血管內(nèi)膜增厚程度。
結(jié)果:B組動(dòng)脈內(nèi)膜從28天起增厚,56天時(shí)增厚明顯,與A組及正常對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),而 A組與正常對(duì)照組相比各時(shí)間點(diǎn)均無顯著差異(p>0.05)。B組56天時(shí)的病理變化主要是單核巨噬細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)在內(nèi)
3、膜積聚,中膜平滑肌細(xì)胞增殖并向內(nèi)膜遷移,致內(nèi)膜呈彌漫―同心圓‖樣增厚。B組動(dòng)脈內(nèi)膜改變與心臟移植物血管病相類似。
結(jié)論:運(yùn)用套管法建立胸主動(dòng)脈腹腔移植模型來模擬心臟移植物血管病是簡(jiǎn)便、可行的。該模型可用于心臟移植物血管病發(fā)病機(jī)制及其防治措施的研究。
第二部分雷公藤內(nèi)酯醇經(jīng)NF-κB信號(hào)通路防治心臟移植物血管病的研究
目的:觀察雷公藤內(nèi)酯醇對(duì)于心臟移植物血管病發(fā)展的影響,并探究雷公藤內(nèi)酯醇阻斷NF-κB及其下
4、游分子表達(dá)的機(jī)制。
方法:30只SD大鼠做受體,30只Wistar大鼠做供體,利用第一部分的方法建立異基因胸主動(dòng)脈腹腔移植模型后,隨機(jī)分成2組,分別為C組(雷公藤內(nèi)酯醇干預(yù)組):Wistar大鼠胸主動(dòng)脈移植至SD大鼠腹主動(dòng)脈,術(shù)后第1天起,雷公藤內(nèi)酯醇(200μg/kg/天)灌胃;D組(雷帕霉素干預(yù)組):Wistar大鼠胸主動(dòng)脈移植至SD大鼠腹主動(dòng)脈,術(shù)后第1天起,雷帕霉素(1.25mg/kg/天)灌胃;每組各15只;于術(shù)后第
5、7、28、56天3個(gè)時(shí)間點(diǎn)(n=5),留取移植血管后處死大鼠。移植血管行病理染色觀察血管病理情況,行免疫組織化學(xué)染色觀察NF-κB、NOS2、VCAM-1及ICAM-1的表達(dá)情況,第一部分標(biāo)本為對(duì)照組。
結(jié)果:
1.在28、56天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn),雷公藤內(nèi)酯醇干預(yù)組(C組)及雷帕霉素干預(yù)組(D組)血管內(nèi)膜厚度與同基因移植組(A組)及異基因移植組(B組)比較均有顯著差異(p<0.05),C、D組內(nèi)膜厚度比較無顯著差異(p>0
6、.05);C、D組病理學(xué)改變與B組相似,但內(nèi)膜增生、炎性細(xì)胞浸潤、平滑肌細(xì)胞增殖及遷移明顯減少,但較A組明顯。
2. A、B組血管內(nèi)皮細(xì)胞中均表達(dá)NF-κB p65及NOS2,B組較A組表達(dá)明顯增強(qiáng),積分光密度值相比有顯著差異(p<0.05);C組NF-κB p65、VCAM-1、ICAM-1及NOS2在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)明顯減弱,積分光密度值與A組及B組比較均有顯著差異(p<0.05)。
結(jié)論:
1. NF-
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