《黃帝內(nèi)經(jīng)》神與睡眠關(guān)系的理論探討及益元安神方作用的研究.pdf

1、不寐，即失眠是指由于心神失養(yǎng)或心神不寧而引起經(jīng)常不能獲得正常睡眠為特征的一類病證。學(xué)習(xí)記憶力減退屬中醫(yī)“善忘”、“健忘”范疇，是機(jī)體學(xué)習(xí)、記憶功能的重要體現(xiàn)。當(dāng)今社會(huì)生活、工作壓力逐漸增大，失眠成為影響人類生活質(zhì)量的重要因素之一，部分長期失眠者的學(xué)習(xí)記憶力可見不同程度的下降。不寐由多種因素導(dǎo)致，老年人多由年高體衰，各臟腑功能損傷導(dǎo)致，青年人則多因飲食不節(jié)，起臥失常等。此類睡眠障礙可通過建立睡眠剝奪動(dòng)物模型進(jìn)行模擬，本課題擬建立慢性不完全

2、性睡眠剝奪模型，并觀察益元、保元、三草安神方對模型的學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
　　第一部分理論研究
　　《黃帝內(nèi)經(jīng)》認(rèn)為神對于睡眠具有非常重要的作用。狹義的神在機(jī)體的神志活動(dòng)中發(fā)揮著主宰作用，總領(lǐng)人體的思維意識活動(dòng);廣義的神則主宰人體的一切生命活動(dòng)。尤其心神，在五神中起到了統(tǒng)領(lǐng)魂、魄、意、志的作用?；诖颂攸c(diǎn)，人的睡眠狀態(tài)正是心神主動(dòng)內(nèi)斂，魂隨心神內(nèi)潛，失去對魄的激發(fā)而形成的。營衛(wèi)是魂魄活動(dòng)的基礎(chǔ)，其循環(huán)運(yùn)行、陰陽出入的規(guī)律是睡

3、眠活動(dòng)產(chǎn)生的關(guān)鍵所在，營衛(wèi)與晝夜陰陽消長節(jié)律同步的活動(dòng)規(guī)律也保證了睡眠的生理自律性。五臟是人體生命活動(dòng)的核心，其藏精、化氣、生神是睡眠活動(dòng)的基礎(chǔ)。故據(jù)此提出神主導(dǎo)睡眠，心神失養(yǎng)、心神不寧則會(huì)引起不寐。
　　第二部分實(shí)驗(yàn)研究
　　1慢性不完全性睡眠剝奪小鼠模型一般狀態(tài)及學(xué)習(xí)記憶的影響
　　目的:對需要進(jìn)行慢性不完全性睡眠剝奪(chronic incomplete sleepdeprivation，CSD)模型的小鼠進(jìn)行初

4、步篩選，以排除部分先天性游泳能力、體能較差的小鼠。并建立CSD模型，探討各安神方對CSD小鼠一般體征狀況及學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
　　方法:選用清潔級昆明種小鼠，6周齡，體重20±2g，雌雄各半，100只。經(jīng)Morris水迷宮訓(xùn)練3天后，篩除體力及學(xué)習(xí)記憶成績不合格者。采用改良多平臺(tái)水環(huán)境睡眠剝奪法（MMPM）進(jìn)行睡眠剝奪，每天剝奪16h，連續(xù)21d。觀察各給藥組對CSD模型動(dòng)物的體重、皮毛、體力、精神狀態(tài)及反應(yīng)能力等生理指標(biāo)的影響

5、。并利用Morris水迷宮檢測各實(shí)驗(yàn)組小鼠定位航行能力和空間探索能力。
　　結(jié)果:①一般體征變化:從造模第10天開始到造模結(jié)束，與對照組小鼠一般情況良好的狀況相比，模型組和各用藥組出現(xiàn)不同程度的躁狂、攻擊性高、撕咬、脫毛、便稀等體征，西藥組、益元高組、三草高組的體征較模型組、益元低組、三草低組、保元高低組程度輕。②體重變化:造模開始到結(jié)束，觀察第3、7、13、19、21d小鼠體重增長的變化，對照組小鼠體重增長速度較模型組和各用藥組

6、體重快;與模型組比較，西藥組、益元高組、三草高組在自第13d開始，體重增長值有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而其余四個(gè)給藥組的體重增長值與模型組相比無明顯差異。③測試各組小鼠造模期間的第1d、13d、21d的定位航行能力和對位探查能力，第1d各組間無差異，第13d開始發(fā)現(xiàn)與對照組比較，模型組和各用藥組錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)明顯增多。模型組與對照組之間有明顯差異;西藥組、益元高組、三草高組與模型組對比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而其余給藥組無明顯差別。
　　結(jié)論:CSD導(dǎo)致

7、小鼠一般體征、體重的改變，且可能會(huì)損害小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
　　2各安神方對CSD小鼠腦內(nèi)SOD、MDA的影響
　　目的:復(fù)制CSD小鼠模型，同時(shí)每日分別給予藥物灌胃21d，觀察各給藥組對CSD小鼠腦內(nèi)自由基含量的影響。
　　方法:按SOD、MDA試劑盒說明書步驟檢測。
　　結(jié)果:與對照組比較，模型組SOD含量降低，MDA的含量上升有非常顯著差異;與模型組比較，益元高、三草高、西藥組SOD含量和MDA的含量的改變

8、，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組相比，其余給藥組SOD、MDA的含量的改變無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:①CSD能導(dǎo)致小鼠腦內(nèi)SOD活性下降、MDA含量上升。②益元高劑量、三草高劑量、西藥均能改善因CSD所致的腦內(nèi)自由基清除率降低，高劑量的益元、三草安神方以及西藥能部分改善腦內(nèi)自由基清除功能，保元方改善腦內(nèi)自由基清除的作用不明顯。
　　3各安神方對CSD模型小鼠腦內(nèi)NO、NOS的影響
　　目的:復(fù)制CSD小鼠模型，同時(shí)每日

9、分別給予藥物灌胃21d，觀察各給藥組對CSD小鼠腦內(nèi)一氧化氮及其酶含量的影響。
　　方法:按NO、NOS試劑盒說明書步驟檢測。
　　結(jié)果:與對照組比較，模型組NO、NOS含量升高有顯著差異;與模型組比較，益元高組、三草高組、西藥組小鼠的腦內(nèi)NO、NOS的含量改變有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而剩余給藥組的差異不明顯。
　　結(jié)論:①睡眠剝奪能導(dǎo)致小鼠腦內(nèi)NO、NOS的上升。②益元、三草安神方的高劑量及西藥組能改善睡眠剝奪所致的NO、NO

10、S清除率降低趨勢，保元高低組及其余給藥組改善腦內(nèi)NO、NOS清除功能不明顯。4各安神方對慢性不完全性睡眠剝奪小鼠腦內(nèi)乙酰膽堿的影響
　　目的:復(fù)制慢性不完全性睡眠剝奪小鼠模型，同時(shí)每日分別給予藥物灌胃21d，觀察各給藥組對CSD小鼠腦內(nèi)TchE、ChAT含量的影響。
　　方法:按TchE、ChAT試劑盒說明書步驟檢測。
　　結(jié)果:與對照組比較，模型組TchE、ChAT含量的降低有顯著差異;與模型組比較，益元高、三草高、