兒童血液感染嗜麥芽窄食單胞菌的耐藥現(xiàn)狀及耐藥基因分布研究.pdf

1、目的：
　　對(duì)十堰地區(qū)2013年度兒童血液感染嗜麥芽窄食單胞菌的陽(yáng)性菌株進(jìn)行研究，分析其耐藥表型、耐藥基因存在狀況和菌株的親緣性，從而了解嗜麥芽窄食單胞菌本地流行狀況，揭示其耐藥機(jī)制，指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物，為減少其耐藥菌株的爆發(fā)流行及傳播奠定理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　收集湖北省十堰市三甲醫(yī)院(太和醫(yī)院、婦女兒童醫(yī)院）2013年度醫(yī)院兒科病人血液感染嗜麥芽窄食單胞菌的陽(yáng)性菌株35株，K-B法檢測(cè)臨床常用抗菌藥物的敏

2、感性；分別用標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法檢測(cè)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)，改良三維試驗(yàn)檢測(cè)AmpC酶（AmpC）、非金屬碳青霉烯酶（KPC）、金屬酶（MBLS）等耐藥表型；對(duì)醫(yī)院常用的消毒劑苯扎溴銨用瓊脂稀釋法測(cè)定其最低抑菌濃度(MIC)；PCR檢測(cè)其耐藥基因,電泳擴(kuò)增產(chǎn)物，陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行基因正反向測(cè)序分析，揭示耐藥基因亞型的分布；用多個(gè)分子標(biāo)志分型法，以耐藥基因?yàn)榉肿訕?biāo)志作檢測(cè)結(jié)果的樣本聚類分析，檢測(cè)菌株的親緣性。
　　結(jié)果：
　　3

3、5株陽(yáng)性菌株檢出不同的β-內(nèi)酰胺酶耐藥表型：16株檢出ESBLS，5株檢出AmpC酶，18株檢出MBLS，未檢出KPC酶。通過(guò)PCR及基因測(cè)序檢出：bla TEM-1基因8株、陽(yáng)性率為22.8％，bla SHV基因4株、陽(yáng)性率11.4%，bla CARB-2基因6株、陽(yáng)性率17.1%，bla IMP基因23株、陽(yáng)性率66%，bla OXA-10基因3株、陽(yáng)性率8.6%，oprD2基因10株、陽(yáng)性率28.5%。未檢出bla KPC、bla

4、 PER、blaVEB、bla GES、blaVIM、blaSPM、bla GIM、blaDHA、bla OXA-1、bla OXA-2基因。
　　氨基糖苷類修飾酶(AMEs)基因檢測(cè)結(jié)果：aac(6’)-I基因24株，陽(yáng)性率68.6%，ant(2″)-I基因17株，陽(yáng)性率48.6%，ant(3″)-I基因6株，陽(yáng)性率17.1%，aac(6’)-II基因3株，陽(yáng)性率8.6%。
　　喹諾酮類基因檢測(cè)結(jié)果：gyrB基因6株，陽(yáng)性

5、率17.1%，未檢測(cè)出gyrA基因。
　　對(duì)醫(yī)院常用消毒劑：苯扎溴銨，測(cè)定的MIC在8～32ug/ml之間，高于對(duì)照菌ATCC13637的MIC值（t檢驗(yàn)，t=11.43，P＜0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）；消毒劑與磺胺耐藥相關(guān)基因qacE△1-sul1的PCR檢測(cè)及基因測(cè)序結(jié)果的陽(yáng)性率為100%。
　　聚類分析提示35株細(xì)菌之間有一定的親緣關(guān)系。
　　結(jié)論：
　　2013年度,35株醫(yī)院陽(yáng)性菌株：對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗菌藥

6、物產(chǎn)生耐藥的原因主要與攜帶以下基因(bla TEM、bla SHV、bla OXA、bla CARB、bla IMP)等基因以及膜孔蛋白基因oprD2的缺失有關(guān)。基因序列分析分別為T(mén)EM-1、OXA-10、CARB-2亞型；對(duì)氨基糖苷類抗菌藥物耐藥情況比較嚴(yán)重，77.9%的菌株對(duì)兩種氨基糖苷類抗菌藥物均耐藥，基因檢測(cè)結(jié)果顯示：十堰地區(qū)醫(yī)院兒童血液感染多重耐藥嗜麥芽窄食單胞菌主要以攜帶aac(6’)-I和ant(2″)-I基因?yàn)橹?；檢測(cè)出