心肺復(fù)蘇后大鼠皮質(zhì)區(qū)凋亡相關(guān)性微小RNA的表達(dá)變化研究.pdf

1、目的：
　　觀察心搏驟停-心肺復(fù)蘇(Cardiac-Arrest/CardiopulmonaryResuscitation，CA-CPR)后大鼠大腦皮質(zhì)區(qū)凋亡相關(guān)性微小RNA(microRNA，miRNA)的表達(dá)變化，探討影響CPR的機(jī)制。
　　方法：
　　選擇成年雄性清潔級(jí)SD(Sprague-Dauley)大鼠24只，按隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對(duì)照組、假手術(shù)組和CA-CPR組，每組8只。采用窒息致CA后CPR法建立CA

2、-CPR大鼠模型;正常對(duì)照組不進(jìn)行任何操作;假手術(shù)組僅施行腹腔麻醉、氣管切開、血管穿刺及心電監(jiān)護(hù)等操作，不夾閉氣管，不復(fù)蘇。CA-CPR組于自主循環(huán)恢復(fù)后(Restoration of spontaneous circulation，ROSC)、正常對(duì)照組于正常飼養(yǎng)、假手術(shù)組于氣管切開后24 h時(shí)取大腦皮質(zhì)區(qū)提取總RNA(Ribonucleic acid)，采用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Quantitative real-timef

3、luorescent quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction, qRT-PCR)測(cè)定大腦皮質(zhì)區(qū)凋亡相關(guān)性miRNA的表達(dá);采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡率;光鏡下觀察各組ROSC后24 h時(shí)點(diǎn)大鼠皮層額葉組織病理改變。
　　結(jié)果：
　　與正常對(duì)照組比較，假手術(shù)組大鼠miRNA表達(dá)及細(xì)胞凋亡率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與假手術(shù)組比較，CA

4、-CPR組大鼠大腦皮質(zhì)凋亡相關(guān)性miRNA有16個(gè)上調(diào)（分別為Let-7c、miR-15a、miR-21、miR-24、miR-29、miR-29b、miR-34a、miR-103、miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-210、miR-326、miR-338-3p、miR-494、miR-497），22個(gè)下調(diào)（分別為Let-7a、Let-7b、Let-7d、Let-7e、miR-19a、miR-19b-1、miR

5、-20a、miR-20b、miR-23a、miR-23b、miR-25、miR-98、miR-107、miR-122a、miR-125a、miR-125b、miR-145、miR-181a、miR-181c、miR-335、miR-384-5p、miR-422a），其中有8個(gè)miRNA出現(xiàn)變化明顯，其中（miR-15a、miR-21、miR-34a、miR-497分別上調(diào)了:6.831±2.625、8.122±3.442、5.349±2

6、.010、6.590±3.689倍;miR-125b、miR-145、Let-7a、Let-7e分別下調(diào)了0.122±0.039、0.199±0.096、0.191±0.069、0.160±0.082倍）。CA-CPR組皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡率[（32.23±5.31）％]較正常對(duì)照組[（3.66±1.34）％]和假手術(shù)組[（4.98±1.84）％]明顯升高（均P＜0.01）。光鏡下CA-CPR組大鼠皮層額葉組織及海馬細(xì)胞出現(xiàn)顯著的病理變化;結(jié)