BDNF、plasminogen在抑郁模型大鼠海馬區(qū)的表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　通過(guò)建立慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激大鼠抑郁模型(Chronic unpredictable mildstress，CUMS)，檢測(cè)大鼠出現(xiàn)的快感缺失，對(duì)新異環(huán)境的探索能力減少，行動(dòng)能力減弱，體重減輕等一系列與抑郁相關(guān)的癥狀。繼而觀(guān)察海馬病變，探討應(yīng)激對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活的影響;同時(shí)檢測(cè)大鼠海馬內(nèi)血漿纖溶酶原(plasminogen)和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor，

2、BDNF)的表達(dá)，探討plasminogen和BDNF與抑郁障礙的相關(guān)性，加深對(duì)抑郁障礙發(fā)病分子機(jī)制的認(rèn)識(shí)，為抑郁障礙的診斷和治療提供新的思路。
　　方法:
　　1.建立CUMS大鼠抑郁模型，實(shí)驗(yàn)組大鼠接受21天各種不同的隨機(jī)安排的應(yīng)激刺激，包括:冰水游泳、室溫游泳、夾尾、整夜光照、潮濕墊料。
　　2.通過(guò)糖水偏愛(ài)測(cè)驗(yàn)，曠場(chǎng)試驗(yàn)，體質(zhì)量測(cè)驗(yàn)，檢測(cè)大鼠的抑郁樣表現(xiàn)。
　　3.取大鼠海馬組織。常規(guī)HE染色觀(guān)察海馬病變

3、。免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry, IHC)及蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)方法分析大鼠海馬組織plasminogen和BDNF蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1.糖水偏愛(ài)測(cè)驗(yàn)
　　實(shí)驗(yàn)處理前空白對(duì)照組(Control，Con)與抑郁障礙組(Stress，St)2h內(nèi)糖水消耗量無(wú)顯著差異(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)處理后，兩組糖水消耗量有顯著差異(P＜0.01)。
　　2.體質(zhì)量

4、測(cè)驗(yàn)
　　實(shí)驗(yàn)處理前Con組與St組體質(zhì)量無(wú)顯著性差異（P＞0.05），實(shí)驗(yàn)處理后兩組體質(zhì)量較實(shí)驗(yàn)處理前均有顯著升高(P＜0.05）。Con組體質(zhì)量增長(zhǎng)率顯著高于St組(P＜0.05)。
　　3.曠場(chǎng)試驗(yàn)
　　實(shí)驗(yàn)處理前，Con組與St組在水平運(yùn)動(dòng)得分，垂直運(yùn)動(dòng)得分和停留時(shí)間等行為學(xué)評(píng)分方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。實(shí)驗(yàn)處理后Con組行為學(xué)評(píng)分較實(shí)驗(yàn)處理前無(wú)顯著差異（P＞0.05），而St組的行為學(xué)評(píng)分顯著降低

5、（P＜0.05）。并且Con組水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)得分顯著低于St組，停留時(shí)間顯著高于St組（P＜0.05）。
　　4.大鼠海馬切片病理結(jié)果
　　對(duì)照組神經(jīng)細(xì)胞排列密集，呈極性分布，細(xì)胞顆粒較大，形態(tài)飽滿(mǎn)，胞漿呈嗜堿性，個(gè)別椎體細(xì)胞萎縮。實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)細(xì)胞層數(shù)減少，細(xì)胞數(shù)目明顯減少，細(xì)胞核消失，胞漿空亮，并可見(jiàn)凋亡細(xì)胞。
　　5.免疫組織化學(xué)法半定量
　　plasminogen和BDNF在對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬區(qū)陽(yáng)性表

6、達(dá)的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　6.蛋白質(zhì)印記法定量
　　plasminogen和BDNF在對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬區(qū)陽(yáng)性表達(dá)的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。plasminogen與BDNF的變化呈明顯正相關(guān)(r=0.65，P＜0.01)，回歸分析表明它們之間都存在明顯的依存關(guān)系，r2=0.423，回歸方程為:(Y)BDNF=0.750Xplasminogen+0.201。
　　結(jié)論:
　　大鼠