窒息大鼠心肺復蘇模型的改良及復蘇后大鼠腦組織AQP4表達變化的研究.pdf

1、第一部分窒息大鼠心肺復蘇模型的改良 目的：改良窒息大鼠心肺復蘇模型；探討心臟停搏持續(xù)時間對自主循環(huán)恢復后6h存活率和腦含水量的影響，為后續(xù)實驗確定合適的心臟停搏時間。 方法：健康雄性SD大鼠36只，隨機分為4組：對照組(n=6)，CAlrain組、CA3min組、CA5min組，后三組每組均為10只。對照組僅予氣管切開插管、股動、靜脈置管，手術后6h處死。其它各組予氣管切開插管、股動、靜脈置管，呼氣末夾閉氣管導管模擬窒息

2、，心臟停搏(cardiac arrest，CA)持續(xù)1min、3min、5min后實施心肺復蘇，應用心電監(jiān)護儀監(jiān)測三組大鼠心肺復蘇期間平均動脈壓(mean arterial pressure，MAP)、心率(heart rate,HR)及體溫的動態(tài)變化，股動脈采血監(jiān)測血氣的動態(tài)變化，并觀察三組大鼠自主循環(huán)恢復(restoration of spontaneous circulation,ROSC)時間、復蘇成功率及ROSC后6小時的存活

3、率及腦含水量(brain water content,BWC)。 結果：CA3min組的復蘇成功率、ROSC后6h存活率與CA5min組比較，有顯著性差異。CA3min組BWC與CA1min比較有顯著性差異(P<0.05)。 結論：1．改進窒息大鼠心肺復蘇模型，改良后的模型更加穩(wěn)定，復蘇成功率和ROSC后6h存活率均顯著高于未改良前。 2．心臟停搏3min后復蘇成功率和ROSC后6h存活率均較高，ROSC后6h的

4、BWC增加明顯。利用窒息大鼠進行心肺復蘇后腦水腫研究，可選擇3min為實驗心臟停搏時間。 第二部分心肺復蘇后大鼠腦組織水通道蛋白-4及其mRNA的動態(tài)變化和亞低溫對其影響的研究 目的：探討復蘇后早期腦水腫的變化規(guī)律，AQP4及其mRNA在腦水腫發(fā)生、發(fā)展中的作用，以及亞低溫減輕心肺復蘇后腦水腫的可能機制。 方法：雄性SD大鼠66只，隨機分為3組，分別為對照組、常溫復蘇組、亞低溫組，后兩組各自進一步分為5個亞組，即

5、自主循環(huán)恢復后0．5、1、3、6和9小時組。建立窒息大鼠心肺復蘇模型，應用干濕重法測定自主循環(huán)恢復后0．5、1、3、6和9小時腦組織含水量的變化；同時觀察各時間點腦組織形態(tài)學的變化。利用免疫組織化學染色半定量分析的方法，檢測相同觀察時點腦組織AQP4表達水平的變化。運用RT-PCR方法檢測腦組織AQP4mRNA表達的變化，分析AQP4、AQP4mRNA與BWC的相關性。 結果：1．常溫組大鼠，ROSC后0.5hBWC開始增加，隨

6、著時間的延長BWC明顯增加，各觀察時點BWC與對照組比較，均有顯著性差異(P值<0.05)。腦組織形態(tài)學的變化與以上結果相符。同時，復蘇后腦組織．AQP4蛋白水平、AQP4mRNA的表達，也呈現出與BWC變化幾乎相同的趨勢。相關分析表明，BWC與腦組織AQP4、AQP4mRNA水平表達呈明顯正相關，相關系數(r)分別為0.847和0.771，(P<0.01)。 2．ROSC后0.5小時，亞低溫組大鼠BWC和腦組織AQP4表達水平

7、與常溫組同一觀察時點比較無明顯變化；亞低溫作用1h、3h、6h和9h時，上述指標均較相同觀察時點常溫復蘇組明顯降低(P值均<0.05)。相關分析表明，亞低溫作用9h內，BWC與腦組織AQP4、AQP4mRNA表達水平呈明顯正相關，r分別為0.769和0.780，(p<0.01)。 結論：1．心肺復蘇后0.5h已出現腦水腫，并隨著ROSC時間點的延長，腦水腫逐漸加重。 2．腦組織AQP4及其mRNA在ROSC后0.5h表達