卵巢癌淋巴結定向轉移與非定向轉移差異性基因的分析與驗證.pdf

1、目的：人卵巢漿液性乳頭狀腺癌細胞系SKOV3及其在裸鼠體內(nèi)建立的淋巴結定向高轉移亞克隆SKOV3-pm，為卵巢癌轉移分子機制的深入研究提供了細胞模型，本實驗室已經(jīng)采用功能分類基因芯片技術，篩選出與卵巢癌淋巴結定向高轉移密切相關的基因，為了驗證基因芯片結果的準確性，我們選取了其中的integrinα6、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA、PTEN九個基因，探討以上基因在卵巢癌不同淋巴結轉移能力

2、細胞亞系的表達，以及integrinα6蛋白在卵巢惡性腫瘤組織以及不同淋巴結轉移能力細胞系表達以及臨床意義。 方法：采用TRIZOL一步法抽提卵巢癌不同淋巴結轉移能力細胞的總RNA，逆轉錄合成CDNA，應用RT-PCR技術檢測PTEN、integrinα6、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA-1九個基因在不同細胞亞系表達的灰度值，實時熒光定量PCR技術對PTEN、integrinα6

3、、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA九個基因在不同細胞亞系的表達進行定量分析。選取20例臨床病例，針對原發(fā)病灶、淋巴結以及不同淋巴結轉移能力細胞系進行integrinα6免疫組化檢測，分析其與卵巢癌淋巴結轉移的關系。 結果：Integrinα6基因在SKOV3、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3細胞系中的表達呈上升趨勢，但在SKOV3-PM4細胞系中的表達低于SKOV3細胞系。F

4、LICE、FGF2、MTA1、Maspin、TRANSIN基因在SKOV3-PM細胞系中的表達均比Skov3細胞系中的表達要高，TIMP3、MKK4基因在SKOV3-PM細胞系中的表達均比Skov3細胞系中的表達要低，且MKK4基因表達量在SKOV3、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3、SKOV3-PM4細胞系呈逐漸下降趨勢，PTEN基因在SKOV3表達而在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-PM4細胞系幾乎不表達。