卵巢癌淋巴結(jié)定向轉(zhuǎn)移與非定向轉(zhuǎn)移差異性基因的分析與驗證.pdf

1、目的：人卵巢漿液性乳頭狀腺癌細胞系SKOV3及其在裸鼠體內(nèi)建立的淋巴結(jié)定向高轉(zhuǎn)移亞克隆SKOV3-pm，為卵巢癌轉(zhuǎn)移分子機制的深入研究提供了細胞模型，本實驗室已經(jīng)采用功能分類基因芯片技術(shù)，篩選出與卵巢癌淋巴結(jié)定向高轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的基因，為了驗證基因芯片結(jié)果的準確性，我們選取了其中的integrinα6、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA、PTEN九個基因，探討以上基因在卵巢癌不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力

2、細胞亞系的表達，以及integrinα6蛋白在卵巢惡性腫瘤組織以及不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力細胞系表達以及臨床意義。 方法：采用TRIZOL一步法抽提卵巢癌不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力細胞的總RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成CDNA，應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測PTEN、integrinα6、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA-1九個基因在不同細胞亞系表達的灰度值，實時熒光定量PCR技術(shù)對PTEN、integrinα6

3、、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA九個基因在不同細胞亞系的表達進行定量分析。選取20例臨床病例，針對原發(fā)病灶、淋巴結(jié)以及不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力細胞系進行integrinα6免疫組化檢測，分析其與卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 結(jié)果：Integrinα6基因在SKOV3、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3細胞系中的表達呈上升趨勢，但在SKOV3-PM4細胞系中的表達低于SKOV3細胞系。F

4、LICE、FGF2、MTA1、Maspin、TRANSIN基因在SKOV3-PM細胞系中的表達均比Skov3細胞系中的表達要高，TIMP3、MKK4基因在SKOV3-PM細胞系中的表達均比Skov3細胞系中的表達要低，且MKK4基因表達量在SKOV3、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3、SKOV3-PM4細胞系呈逐漸下降趨勢，PTEN基因在SKOV3表達而在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-PM4細胞系幾乎不表達。