乳腺癌多發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或非前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險的研究.pdf

1、背景與目的：
　　前哨淋巴結(jié)(sentinel lymph node，SLN)是最先接受淋巴引流的一個或數(shù)個淋巴結(jié)。Z0011試驗提出對于符合條件的部分病人即使存在1-2個SLN陽性，也可以不行進一步的腋窩淋巴結(jié)清掃。然而，對于存在高危因素的乳腺癌病人，可能仍將從腋窩淋巴結(jié)清掃獲益。因此，如何評估乳腺癌腋窩淋巴結(jié)的多發(fā)轉(zhuǎn)移風險，尤其是1-2個SLN陽性病人的非SLN狀態(tài)仍是一個重要的課題。陰性SLN的數(shù)量是預(yù)測非SLN轉(zhuǎn)移狀態(tài)的重

2、要因素之一。如何在保證獲得足夠SLN的同時，保證手術(shù)的微創(chuàng)化也是一個重要的技術(shù)性問題。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是判斷乳腺癌預(yù)后的一個重要因素。若能從分子水平發(fā)現(xiàn)一些早期預(yù)判淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險的信號將可能會改善病人的預(yù)后。我們將根據(jù)先前研究發(fā)現(xiàn)的危險因素篩選相關(guān)的病人進行RNA測序探索淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的高危因素。
　　病人與方法：
　　第一部分 3個或以上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險的研究
　　回顧性分析在我院接受腋窩淋巴結(jié)清掃的pT1-2N1-3M0乳腺癌

3、病人?；仡櫟呐R床病理指標包括:年齡、腫瘤最大徑、是否存在多病灶、是否存在脈管侵犯、激素受體狀態(tài)、HER-2狀態(tài)以及Ki67狀態(tài)。存在1-2個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人和存在3個或以上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人進行對照分析。
　　第二部分 非SLN轉(zhuǎn)移的風險研究
　　觀察我院接受SLN活檢的cT1-2N0M0乳腺癌病人的臨床病理因素，包括:年齡、腫瘤最大徑、是否存在多病灶、是否存在脈管侵犯、陽性SLN的數(shù)量、陰性SLN的數(shù)量、激素受體狀態(tài)、HER

4、-2狀態(tài)和Ki67狀態(tài)。所有病人均使用藍染的方法。結(jié)合治療原則及病人的意愿選擇是否接受腋窩淋巴結(jié)清掃。對不同數(shù)量的陰性SLN和陽性SLN對非SLN轉(zhuǎn)移的影響進行對照研究。對1-2枚SLN轉(zhuǎn)移病人出現(xiàn)非SLN轉(zhuǎn)移的風險因素進行對照分析，并建立風險預(yù)測模型。
　　第三部分 RNA測序探索淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機制
　　根據(jù)先前工作篩選出的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移危險因素在我院找出2例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高風險，但是未出現(xiàn)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人;2例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移低風險，

5、但是出現(xiàn)了多枚淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人。使用Trizol法提取RNA并進行測序。腫瘤組織和正常組織的差異表達基因(differentially expressed genes，DEGs)通過LIMMA包這一線性回歸模型進行分析鑒定。DEGs的功能分析使用GO和KEGG富集分析。并使用Cytoscape來構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)。探索對乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能有影響的分子機制。
　　結(jié)果：
　　第一部分 3個或以上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險的研究
　　8

6、03例存在腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人中453例病人存在1-2個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，350例病人存在3個或以上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。多因素分析顯示:腫瘤較大、存在脈管侵犯、HER-2過表達為乳腺癌出現(xiàn)3個或以上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的獨立危險因素。
　　第二部分 非SLN轉(zhuǎn)移的風險研究
　　總共723例cT1-2N0M0乳腺癌病人接受了SLN活檢。其中472例病人接受了腋窩淋巴結(jié)清掃，56.4％的病人SLN陰性。在所有SLN陽性的病人中，73.8％只有1枚陽性S

7、LN，20.4％的病人有2枚陽性SLN，5.3％的病人存在3枚或以上陽性SLN。腫瘤較大、存在陽性SLN、不存在陰性SLN、HER-2陽性為出現(xiàn)非SLN轉(zhuǎn)移的顯著性危險因素。有無存在陽性SLN或陰性SLN與非SLN的轉(zhuǎn)移存在顯著性差異，但陽性SLN或者陰性SLN的數(shù)量(＞0)與非SLN的轉(zhuǎn)移無顯著性差異。未接受腋窩淋巴結(jié)清掃病人(n=251)中位隨訪時間為34個月，沒有出現(xiàn)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。
　　對215例存在1-2枚SLN轉(zhuǎn)移的乳

8、腺癌病人的臨床病理特點進行對照分析顯示:腫瘤較大、存在脈管侵犯、不存在陰性SLN、HER-2陽性為1-2枚SLN陽性病人出現(xiàn)非SLN轉(zhuǎn)移的獨立危險因素。215例病人中有15.3％(33/215)為出現(xiàn)非SLN轉(zhuǎn)移的“高風險”人群，其中有90.9％(30/33)的病人被證實存在非SLN轉(zhuǎn)移。
　　第三部分 RNA測序探索淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機制
　　HRNM_T（淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高風險病人腫瘤組織）vs HRNM_N（淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高風險病人正常

9、組織）中的DEGs主要富集于細胞周期，IL-17信號通路以及孕酮介導的卵母細胞成熟信號通路。LRYM T（淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移低風險病人腫瘤組織）vsLRYM_N（淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移低風險病人正常組織）中的DEGs主要富集于蛋白質(zhì)的消化與吸收，細胞因子與細胞因子受體間的交互作用，以及細胞外基質(zhì)受體相互作用。HRNM_T vs LRYM_T中的DEGs主要富集于PPAR信號通路和脂肪細胞因子信號通路。
　　結(jié)論：
　　對于存在腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高風